瑶浴清消方对小鼠急性湿疹模型炎症因子IL-4、TNF-α、IFN-γ的干预机制及药效研究
目的：明确瑶浴清消方安全性和抗炎、止痒的药效作用，通过观察瑶浴清消方对小鼠急性湿疹模型血清中炎症因子白介素-4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达影响，初步探索瑶浴清消方对急性湿疹的作用和可能的机制。 方法：（1）急性毒理实验，将30只SPF级大鼠随机分成空白组、完整皮肤组、破损皮肤组，每组共10只，雌雄各半。于24小时内分两次给药完毕，以大鼠体重、皮肤、毛发等改变，呼吸频率、进食、饮水、排便及分泌物、运动是否异常观测指标为观测，判断是否有中毒表现或死亡。（2）抗炎实验，将50只雄性KM小鼠随机分成对照组、皮肤康药组、瑶浴清消方高剂量组、瑶浴清消方中剂量组、瑶浴清消方低剂量组，每组各10只。以巴豆油为致炎剂涂于小鼠右耳，于4小时后沿耳缘线剪下双耳，放于精密分析天平称量重量，计算耳肿肿胀度和肿胀抑制率。（3）止痒实验，将30只豚鼠随机分成空白组、皮肤康洗液组、瑶浴清消方高剂量组、瑶浴清消方中剂量组、瑶浴清消方低剂量组，每组6只。末次给药前，用砂纸擦伤豚鼠右足足背，于给药后10分钟，开始于豚鼠足背处滴0.05ml0.01%磷酸组织胺溶液，此后每隔3分钟以0.01%，0.02%,0.03%,0.04%…递增浓度，以最后出现豚鼠回头舔右后足所给予的磷酸组织胺浓度剂量为致痒阈。（4）瑶浴清消方对急性湿疹小鼠模型炎症因子干预机制实验，将60只KM小鼠随机分成空白组、模型组、皮肤康组、瑶浴清消方组高剂量组、瑶浴清消方组中剂量组、瑶浴清消方组低剂量组，每组10只。采用2，4-二硝基氯苯腹部致敏，左耳激发方法建立湿疹小鼠模型。同时于致敏第一天给药，造模第12天（末次给药后24小时）取材，取各组小鼠耳片进行观察，对其损伤进行评分；称重，计算肿胀度；HE染色后观察耳片组织形态学改变；用酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血清中炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-4的含量。 结果：（1）瑶浴清消方急性毒理实验显示，14天实验结束后，破损皮肤组和完整皮肤组皮肤均无明显异常，也无全身中毒症状。（2）瑶浴清消方抗炎实验结果显示，各组与空白组相比，耳肿程度有不同程度的减轻，瑶浴清消方中剂量组比皮肤康洗液抗炎效果优（P＜0.01）。（3）瑶浴清消方止痒实验结果显示，皮肤康洗液组和瑶浴清消方高剂量组、瑶浴清消方中剂量组与空白组相比，致痒域都有明显的提高（P＜0.01），皮肤康组与瑶浴清消方中剂量组相比致痒域明显偏低（P＜0.05）。（4）瑶浴清消方干预小鼠急性湿疹模型实验：耳廓皮肤损伤评分，各组与正常组相比评分均增加（P＜0.05），各给药组与模型组相比皮肤损伤评分减少（P＜0.01），其中瑶浴清消方中剂量与皮肤康组相比皮肤损伤评分明显降低（P＜0.01）。耳肿度结果，各组与正常组相比耳肿度均增加，各给药组与模型组相比耳肿度明显减少，其中瑶浴清消方中剂量与皮肤康组相比耳肿度明显减少（P＜0.05）。镜下观察急性湿疹模型小鼠耳片HE染色病理切片，模型组表皮水肿严重且大量的淋巴细胞增生排列在表皮内，并伴随出血，可在细胞间质内看到红细胞出现，提示造模成功，瑶浴清消方中剂量组，细胞水肿、增生情况有明显缓解，且组织结构排列整齐，与空白组相比，淋巴细胞仍偏多，但无明显细胞水肿，急性炎症症状得到缓解；其余给药组耳部炎症症状均轻于模型组，但重于瑶浴清消方中剂量组。瑶浴清消方急性湿疹模型小鼠血清中炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-4含量表达，模型组、皮肤康洗液组、瑶浴清消方各剂量组与正常组相比小鼠血清TNF-α、IL-4含量有明显的增加，IFN-γ含量显著降低，皮肤康洗液组、瑶浴清消方各剂量组与模型组相比，小鼠血清TNF-α、IL-4含量有不同程度的减少，IFN-γ含量显著增加（P＜0.01）。 结论：（1）急性毒理实验：瑶浴清消方在短时间内对于完整皮肤和破损皮肤均无吸收性毒性；（2）抗炎实验证明瑶浴清消方有抗炎作用；（3）止痒实验证明瑶浴清消方有止痒的作用；（4）瑶浴清消方对急性湿疹模型小鼠的干预机制，或是通过下调模型小鼠血清中促炎因子TNF-α、IL-4表达含量并同时上调IFN-γ含量表达，使Th1/Th2恢复平衡，降低体内炎症反应及血管通透性，具有缓解湿疹瘙痒、抑制炎症反应的作用，达到治疗湿疹的目的。
急性湿疹;瑶浴清消方;炎症因子;干预机制;药效评估
广西中医药大学
硕士
民族医学
李彤
2021
中文
R758.23;R285.5
2021-12-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）