肌酸激酶同工酶MM在新生儿杜氏肌营养不良症筛查中的应用研究
目的： 杜氏肌营养不良症（Duchenne muscular dystrophy，DMD）是一种X-连锁的遗传性致死性肌病，临床起病隐匿，极易漏诊。实施新生儿筛查有助于DMD患者的早期识别及临床干预，最终改善患者预后。肌酸激酶同工酶MM（Creatine kinase isoenzyme-MM，CK-MM）是DMD患者发病早期重要的生化标志物。目前，将CK-MM用于DMD新生儿筛查的研究较少，陕西地区缺乏该类研究。本研究通过检测新生儿残留干血斑样本中的CK-MM浓度，初步分析本中心随机新生儿的CK-MM浓度分布情况，并对影响CK-MM浓度分布的相关因素进行分析，为临床上早期筛查和识别DMD提供可靠的依据。 方法： 收集2019年10月1日至2020年5月31日期间在西北妇女儿童医院出生的4572例新生儿的残留干血斑样本，应用时间分辨免疫荧光法对干血斑样本进行CK-MM浓度测定。以2000例样本的CK-MM检测值计算出99.9的百分位数设定截断值，对筛查阳性样本进行原血片复测，将复测仍为阳性的患儿召回，进行临床评估、心肌酶谱、基因检测和定期随访。基因检测包括采用多重连接依赖探针扩增（Multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA）技术检测DMD基因的大片段缺失/重复及采用二代测序(Next generation sequencing，NGS)技术检测64种遗传性肌病相关的基因变异。采用Spearman相关分析分析CK-MM浓度与出生体重、孕周、采血时间的相关关系，采用非参数检验方法分析不同出生体重、孕周、采血时间、分娩方式、性别对CK-MM浓度分布的影响。 结果： 1.通过对4572例新生儿干血斑样本进行CK-MM浓度检测，CK-MM浓度值的中位数为61.60（38.70～103.00）ng/mL。以2000例样本的CK-MM检测值计算出99.9的百分位数设定截断值，截断值为572ng/mL。 2.4572例干血斑样本中高于截断值的有5例，进行原血片复测后有3例筛查阳性，经MLPA检测确诊1例DMD，另外2例MLPA检测阴性，NGS未检出相关致病变异。 3.相关性分析结果表明：CK-MM浓度和出生体重之间没有相关性（rs=0.009，P=0.526）；浓度和孕周、采血时间呈负相关（rs=-0.039，P=0.008；rs=-0.674，P=0.000）。采用非参数Kruskal-Wallis H秩和检验对三组不同的出生体重、孕周、采血时间、分娩方式的CK-MM浓度值分布进行统计学分析，结果表明：三组出生体重和孕周的CK-MM浓度值分布无统计学差异（X2=5.897，P=0.052；X2=1.505，P=0.471）；三组采血时间和分娩方式的CK-MM浓度值分布具有统计学差异（X2=1332.744，P=0.000；X2=850.627，P=0.000）。采用非参数Mann-whitney U检验对不同采血时间、分娩方式、性别做两两比较结果表明，采血时间在3～10天的新生儿CK-MM浓度中位数高于采血时间为10～20天和＞20天，具有统计学差异（Z=-35.844，P=0.000；Z=-10.203，P=0.000）；而采血时间在10～20天与＞20天检测的CK-MM浓度值无统计学差异（Z=-0.241，P=0.810）。分娩方式为剖宫产检测的CK-MM浓度高于顺产与产钳助娩，具有统计学差异（Z=-29.081，P=0.000；Z=-6.214，P=0.000）；而分娩方式在顺产与产钳助娩检测的CK-MM浓度值无统计学差异（Z=-1.228，P=0.219）。两种性别的新生儿筛查的CK-MM浓度值具有统计学差异（Z=-8.343，P=0.000）。 结论： 1.4572例随机新生儿中筛查阳性3例，确诊1例DMD患儿，筛查阳性率为0.07%。CK-MM筛查新生儿DMD的灵敏度为100%，特异度为99.96%，阳性预测值为33.33%。 2.CK-MM浓度受性别、分娩方式和采血时间的影响。男性新生儿CK-MM浓度中位值高于女性，剖宫产分娩的新生儿CK-MM浓度偏高，采血时间在3～10天内，CK-MM浓度随着采血时间的延长而降低，而在采血时间＞10天后CK-MM浓度趋于稳定。 3.确诊患儿的CK-MM浓度gt;5000ng/mL，MLPA结果示DMD基因51号外显子缺失突变，表明应用CK-MM可筛查出新生儿DMD。对CK-MM筛查阳性的病例结合基因检测，可以降低假阳性率。
新生儿;杜氏肌营养不良;临床诊断;肌酸激酶同工酶;浓度分布
西安医学院
硕士
妇产科学
师娟子
2021
中文
R723.130.4
2021-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）