肠道菌群与胆囊胆固醇结石和胆固醇息肉相关性研究
背景：胆囊结石和胆囊息肉样变均是肝胆外科常见病、多发病，而胆囊胆固醇结石和胆囊胆固醇息肉又是上述疾病的主要类型。目前对于胆固醇结石和息肉的发病机制尚不完全明确，两者的形成机制是否有相关性也颇有争议。但据先前研究证实这两种疾病在发生、发展中存在某些共同机制。近年来随着对肠道菌菌群研究的深入，有证据表明肠道菌群可能通过各种机制参与胆囊结石的形成，然而目前尚无肠道菌群与胆囊息肉形成的独立相关性研究。 目的：本研究拟借助高通量测序技术对健康人群、胆囊胆固醇结石和胆固醇息肉患者肠道菌群的组成和结构进行全面描绘；通过对三组人群肠道菌群结构的比较分析来探讨肠道菌群失调是否和胆囊胆固醇结石和胆固醇息肉发病具有相关性；明确胆固醇结石和胆固醇息肉患者的肠道菌群之间是否具有某些相似特征或显著区别，从而为已有的理论基础和后续研究做补充、铺垫，同时也为我们临床防治提供新的思路和依据。 方法：选取于陕西省核工业二一五医院2020年2月至2020年6月普通外科住院行胆囊切除术，且术后病理证实为胆固醇结石、胆固醇息肉患者共35人，其中胆囊胆固醇结石组29人，胆囊胆固醇息肉组6人。健康对照组选取同期健康体检人员共27名。所有研究对象均应符合纳排标准。入组后分别收集疾病组入院后术前清晨第一次粪便，健康组清晨第一次粪便样本并于30分钟内在-80℃超低温冰箱冻存。然后统一对样本进行DNA提取、16SrRNAV3+V4区扩增，最后利用IlluminaHiseq2500测序平台进行高通量测序、构建分库和生物信息分析。 结果： 1.所有62例样本均有细菌DNA检出。 2.所有样本共获得2819414个高质量tags、其中健康组共获得1245171个tags，胆固醇结石组共获得1246729个tags，胆固醇息肉组共获得283432个tags。根据97%的序列相似性，经比对数据库后共鉴定出695个细菌OTUs，其中健康组鉴定出589个OTUs、胆囊胆固醇结石组鉴定出621个OTUs、胆囊胆固醇息肉组鉴定出394个OTUs。 3.三组样本alpha多样性指数统计学分析无显著性差异（P均gt;0.05）；基于非加权Unifrac距离的组间Beta多样性分析具有显著性差异（P=0.0009）；PLS-DA分析中三组样本分别聚成三类，表明三组样本间菌群结构具有差异。 4.在门水平上，三组样本前四种优势菌门均为厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、放线菌门；胆固醇结石组厚壁菌门相对丰度最高；胆固醇息肉组变形菌门相对丰度最高，健康组拟杆菌门相对丰度最高。 5.在属水平上，三组样本前五种优势菌属均为拟杆菌属、普雷沃菌属、普拉梭菌属、沙门氏菌属、埃希氏菌属。胆固醇结石组的埃希氏菌属相对丰度最高；胆固醇息肉组的普雷沃菌属、沙门氏菌属相对丰度最高。 6.在LEfSe分析中胆固醇息肉组的疣微菌从门水平到科水平（包括艾克曼菌属）均显著增高。 结论：本研究首次使用IlluminaHiSeq平台同时对健康者、胆囊胆固醇结石和胆固醇息肉患者这三组人群的肠道菌群进行了高通量测序，并展示了其肠道菌群的多样性和组成结构。本研究发现三组人群的肠道菌群α多样性无显著性差异，而β多样性具有显著性差异。本研究发现三组人群虽然在门水平、属水平上优势菌群一致，但两两之间菌群的相对丰度均有差异。相较于健康组，胆囊胆固醇结石组和胆固醇息肉组均存在菌群失调。肠道菌群失调与胆囊胆固醇结石和胆囊胆固醇息肉发生、发展具有相关性；本研究首次发现胆囊胆固醇息肉组患者疣微菌门（包括艾克曼菌属）从门水平到属水平相对丰度均显著增高，可能作为诊断胆囊胆固醇息肉的生物标记物。
肠道菌群;胆囊胆固醇结石;胆囊胆固醇息肉;高通量测序
西安医学院
硕士
外科学
王智翔
2021
中文
R155
2021-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）