速效复方利多卡因微乳凝胶给药系统的研制及评价
目的： 复方利多卡因乳膏在皮肤局部麻醉以及与疼痛相关的各种医疗程序中均有广泛应用，但由于角质层的屏障作用其存在起效慢、作用时间短等缺陷，不能很好的满足临床所需。微乳可促进药物的经皮渗透，但表面活性剂和醇类助表面活性剂的大量使用造成的安全隐患限制了相关产品的开发。本文在前期研究的基础上，拟设计一种以橄榄油（OL）、肉豆蔻酸异丙酯（IPM）和维生素E琥珀酸酯（VES）为油相的无醇、低表面活性剂的微乳载体，从而制备一种安全、起效速度快的复方利多卡因微乳凝胶局麻制剂。 方法： 1.在处方前研究中，采用高效液相色谱（HPLC）建立体外同时测定利多卡因碱和丙胺卡因碱含量的分析方法，并进行方法学验证。通过考察利多卡因碱、丙胺卡因碱原料药外观、溶解性、熔点等理化性质对原料药进行初步质量评价。利用红外吸收光谱（FTIR）和差示量热扫描分析方法（DSC）进行利多卡因-丙胺卡因低共熔混合物的研究。通过分别测定利多卡因碱、丙胺卡因碱在不同油相以及溶媒中的溶解度，筛选微乳的油相和体外经皮渗透实验的接收液。 2.采用三元相图法，分别制备含不同助表面活性剂、辅助油相的OL-IPM微乳相图，以筛选空白微乳载体。以粒径、多分散指数（PDI）、Zeta电位、黏度、浊度、pH、电导率进行理化性质表征。通过离心、加热-冷却循环以及长期实验对空白微乳载体的稳定性进行评价。 3.将质量比为1:1的利多卡因和丙胺卡因溶入油相，用水滴定法制备复方利多卡因微乳。在质量评价基础上，以载药量、药物经离体豚鼠腹部皮肤的稳态渗透速率和皮内滞留量为评价指标，对微乳的处方和工艺进行优化，确定最优微乳处方。再通过凝胶骨架材料及化学促渗透剂的筛选，最终制得复方利多卡因微乳凝胶。以载药量、粒径、PDI、Zeta电位、黏度和pH等为指标，对制剂进行理化性质表征，通过低温、高温以及长期实验评价制剂的稳定性。 4.以家兔为动物模型，采用皮肤刺激性等级评分结合皮肤病理组织切片苏木素-伊红（HE）染色方法，评价复方利多卡因微乳凝胶的安全性。以药物稳态渗透速率和皮内滞留量为指标，考察复方利多卡因微乳凝胶经离体豚鼠皮肤的渗透活性；以豚鼠为动物模型，市售复方利多卡因凝胶和市售复方利多卡因乳膏为阳性对照，生理盐水为阴性对照，采用局部针刺法对复方利多卡因微乳凝胶的初步药效学作出评价。 结果： 1.建立的HPLC色谱条件为：色谱柱：InertSustain?C18（4.6×250mm，5μm）；流动相：甲醇-0.5%磷酸二氢铵水溶液（80:20，V/V，三乙胺调pH7.0）；检测波长：254nm；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；进样量：20μL。经考察，所建立的分析方法符合方法学要求。利多卡因碱、丙胺卡因碱原料药外观、溶解性、熔点的测定结果显示，原料药质量合格，可用于后续研究。利多卡因和丙胺卡因低共熔混合物熔点低于20℃且两药无化学相互作用。在所试单一油相中，IPM对利多卡因碱、丙胺卡因碱的溶解度最大，OL次之，而在两者的1:1混合物中溶解度达到最大，分别为367.89、488.29mg/mL。利多卡因碱、丙胺卡因碱在20%乙醇-生理盐水中的溶解度达到最大，分别为12.92、9.90mg/mL，故选择其为体外透皮接收液。 2.OL、IPM和VES按质量比3:3:1混合为油相，聚氧乙烯氢化蓖麻油40（RH40）与司盘80（Span80）按5:1质量比混合为表面活性剂，以三元相图微乳区域内最大油相与表面活性剂质量比（O/S）4:6，80%的水含量，制备空白微乳。表征结果显示：空白微乳粒径为36.24nm，PDI值为0.25，Zeta电位为-13.6mV，黏度为17mPa·s，浊度为71.54NTU，pH为6.08，满足微乳粒径小于100nm，PDIlt;0.3，低粘度的要求。空白微乳载体具有离心、加热-冷却循环以及长期稳定性，表明空白微乳可用作复方利多卡因微乳凝胶载体。经优化后的载药微乳工艺和处方为：药物以低共熔混合状态与各组分混合，O/S为3.2:6.8，含水量为75%。凝胶骨架材料为0.6%卡波姆980，促渗剂为3%乙醇。因此，复方利多卡因微乳凝胶的最终处方为：2.5%利多卡因，2.5%丙胺卡因，2.25%OL，2.25%IPM，0.75%VES，9.29%RH40，1.86%Span80，0.6%卡波姆，3%乙醇，75%水。最优微乳凝胶的粒径为52.15nm，PDI值为0.23，Zeta电位为-36.2mV，黏度为77.87Pa·s，pH值为6.75。稳定性结果显示复方利多卡因微乳凝胶具有低温、高温以及长期稳定性。 3.安全性评价实验结果表明，涂抹复方利多卡因微乳凝胶和空白微乳凝胶，对家兔皮肤无严重刺激性；皮肤病理组织切片HE染色结果显示，使用复方利多卡因微乳凝胶后，皮肤各层结构完整，无明显炎性组织病理学改变。 4.豚鼠离体皮肤渗透活性实验表明，复方利多卡因微乳凝胶的药物稳态渗透速率优于对照组。复方利多卡因微乳凝胶的起效时间（无痛反应率50%）为给药后24.84min，最大无痛反应率高达92.5%，药效维持时间为245.16min；市售复方利多卡因凝胶和市售复方利多卡因乳膏起效时间、最大无痛反应率、药效维持时间分别为45.45min、51.62min；86%、80%；201.53min、186.80min。经统计学分析，复方利多卡因微乳凝胶与两款市售制剂的药物稳态渗透速率、起效时间、药效维持时间以及最大无痛反应率均具有统计学差异（plt;0.05）。上述结果表明自制复方利多卡因微乳凝胶起效快，且麻醉镇痛效果优于两款同类市售制剂。 结论： 本文所设计、制备的复方利多卡因微乳凝胶无需助表面活性剂，表面活性剂用量仅为11.15%，安全、稳定、起效速度快，麻醉镇痛效果优于市售制剂。
利多卡因;丙胺卡因;无助表面活性剂-微乳;经皮给药;初步药效学
山西医科大学
硕士
药剂学
田青平
2021
中文
R943
2021-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）