循环肿瘤DNA在弥漫大B细胞淋巴瘤中的应用研究
背景和目的：循环肿瘤DNA，即ctDNA（circulatingtumorDNA），是指肿瘤细胞DNA经细胞凋亡或死亡后释放进入血液循环系统，是一种特征性的肿瘤生物标记物。随着二代测序技术的飞速发展，ctDNA检测的灵敏度大大提高。基于ctDNA检测的肿瘤液态活检技术可以揭秘体内肿瘤组织的突变信息，在恶性肿瘤的临床辅助诊断，疗效评估及耐药性监测，残留病灶监测，复发预测及临床预后评估等多个方面具有广泛的应用前景。多项国外研究表明基于二代测序的ctDNA动态监测对实现弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuselargeBcelllymphoma,DLBCL）动态分子监测，评估疗效及预后，预测疾病复发等方面具有重要意义，但是在中国人群中没有类似研究，该技术是否适合中国DLBCL患者尚需要临床研究来验证。本研究旨在通过检测免疫球蛋白重链（immunoglobulinheavychain,IgH）基因VDJ重排的血浆ctDNA在中国DLBCL人群中发病时的表达情况及2疗程化疗后ctDNA的表达改变，探索基于肿瘤VDJ重排的ctDNA检测在DLBCL的辅助诊断，疗效预测及预后评估中的潜在价值。 方法：收集本院新收治初诊未经治疗的DLBCL患者47例，记录其临床特征，去除因为脏器功能或其他原因不能接受R-CHOP方案化疗者，入组38例患者采用标准R-CHOP（利妥昔单抗加CHOP）免疫化疗。所有入组患者在开始化疗前采集外周血标本10ml通过二代测序法行ctDNA检测，初始阳性的患者于2疗程化疗后再次采集外周血标本10ml复检ctDNA。采用增强CT或PET-CT评估治疗基线及治疗后全身淋巴结大小和代谢情况，参照疗效标准评估疾病治疗效果。所有数据使用SPSS22.0进行统计学分析。P值＜0.05具有统计学差异。 结果： 1.共38例DLBCL患者纳入此研究，男21例，女17例，年龄31-77岁，中位年龄61.5岁。22例原发于淋巴结，余16例原发于淋巴结外。其中AnnArbor分期Ⅰ-Ⅱ期12例，Ⅲ-Ⅳ期26例，伴有B症状者13例，IPI评分0～2分26例，3～5分12例，伴骨髓累及者7例，GCB亚型6例，non-GCB亚型32例，CD5阳性8例，Bcl-2/MYC双表达20例。 2.初始化疗前有31例血浆ctDNA检测呈阳性，7例呈阴性，ctDNA检测阳性率为81.6%，显著高于生化中LDH阳性率（P=0.001）。根据初诊ctDNA检测结果将入组患者分为ctDNA阳性组和阴性组，比较两组间临床特征，ctDNA阳性组患者Bcl-2/MYC双表达比例显著升高（P=0.038），两组在其他临床特征上均无显著差异。 3.诊断时ctDNA阳性和阴性患者经过4疗程R-CHOP化疗后进行疗效评估，两组CR率和OR率均无显著差异。 4.随访时间内，诊断时ctDNA阳性和阴性患者PFS和OS均无显著差异。 5.初诊ctDNA阳性的31例DLBCL患者2疗程化疗后17例(54.8%)转阴，14例(45.2%)仍阳性。ctDNA未转阴组具有更晚的疾病分期（P=0.021），伴有B症状（P=0.031），升高的LDH水平（P=0.012），高风险IPI评分（P＜0.0001）及骨髓累及（P=0.012）。 6.31例初诊ctDNA阳性的DLBCL患者4疗程R-CHOP化疗后进行疗效评估，ctDNA转阴组CR率明显高于未转阴组（58.8%vs7.1%,P=0.007），OR率无显著差异。 7.随访时间内，2疗程化疗后ctDNA转阴患者1年PFS估计值为91.7%，1年OS的估计值为100.0%，均优于未转阴患者（P=0.036和P=0.030）。 8.其他与预后相关的临床参数：通过K-M生存分析发现对PFS的影响存在显著意义的变量有疾病分期（P=0.030）和LDH水平（P=0.031）；对OS的影响存在显著意义的变量有年龄（P=0.019）、IPI评分（P=0.001）、结外累及数目（P=0.035）和LDH水平（P=0.049）。 结论：初诊DLBCL患者血浆ctDNA检测具有很高的阳性率，显著高于血清LDH升高率，并且其阳性率不受疾病分期、累及部位等因素影响，检测血浆ctDNA有助于DLBCL的辅助诊断及残留监测。2疗程化疗后ctDNA能否转阴有助于早期进行疗效预测及预后评估。ctDNA作为一种新兴的肿瘤标记物，具有微创，无辐射暴露，连续采样动态监测等优势，在DLBCL的辅助诊断、残留监测、疗效评估、预测疾病预后等方面具有潜在的应用前景。
弥漫大B细胞淋巴瘤;循环肿瘤DNA;临床疗效;预后
宁波大学
硕士
内科学
欧阳桂芳;盛立霞
2020
中文
R733.1
2021-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）