RMT1-10体外诱导耐受性树突状细胞抑制小鼠高危角膜移植排斥反应机制的研究
目的： 探讨RMT1-10体外诱导耐受性树突状细胞（tolerogenicdendriticcells，Tol-DCs）对小鼠高危角膜移植排斥反应的抑制作用及其机制。 方法： 获取供体骨髓来源的未成熟树突状细胞（immaturedendriticcells,imDCs），按照诱导干预不同分为四组：imDCs组（不干预）；mDCs组（加入脂多糖）；RMT1-10组（加入RMT1-10和脂多糖）；IgG同型对照组（加入IgG同型抗体和脂多糖），7d后流式细胞检测各组DCs细胞表型包括CD11C、CD80、CD86、MHC-II、Tim-4和CD103，同时采用酶联免疫吸附法测定细胞培养液上清中IL-10和TGF-β浓度。建立混合淋巴细胞培养体系，采用CCK-8法检测各组DCs细胞刺激CD4+T细胞增殖的作用。先以角膜基质缝线法诱导BALB/c小鼠角膜新生血管，以4个象限新生血管均匀长入角膜中周区的小鼠作为受体。将80只受体小鼠随机分为4组，每组20只，分别于尾静脉注射上述各组DCs细胞（1×106个细胞/100μL）。7d后以C57BL/6小鼠为供体行穿透性角膜移植。术后每日裂隙灯下观察角膜植片排斥体征包括混浊、水肿及新生血管并进行评分至术后30d。术后21d，每组抽取5只受体小鼠检测迟发型超敏反应（delayedtypehypersensitivity，DTH）。 结果： 与imDCs组相比，RMT1-10组DCs细胞表面CD80、CD86和MHC-II表达差异均无统计学意义（均Pgt;0.05），Tim-4表达明显降低同时CD103表达明显增高，差异均有统计学意义（均P﹤0.0001）。RMT1-10组细胞培养上清液中IL-10和TGF-β浓度明显高于其他组，差异均有统计学意义（均P﹤0.0001）。RMT1-10组DCs细胞对CD4+T细胞增殖的刺激指数明显低于其他组，差异均有统计学意义（均P﹤0.05）。RMT1-10组角膜植片生存率明显高于其他组，差异均有统计学意义(均P﹤0.0001)，且接受RMT1-10组DCs细胞的受体小鼠的DTH反应明显弱于其他组，差异均有统计学意义（均P﹤0.05）。 结论： RMT1-10可以抑制小鼠高危角膜移植排斥反应，其作用机制可能是在体外诱导产生Tol-DCs细胞并通过分泌TGF-β和IL-10促进抗原特异性免疫耐受进而延长角膜植片存活时间。
角膜移植;排斥反应;Tim-1;单克隆抗体;免疫耐受;树突状细胞
承德医学院
硕士
眼科学
谭小波
2021
中文
R779.65
2021-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）