内蒙古蜱传斑点热群立克次体分子流行特征研究
蜱是广泛分布于全球的人畜共患病传播媒介，能携带包括斑点热群立克次体（spottedfevergrouprickettsiae，SFGR）等近168种病原体，严重影响着公众的健康和畜牧业的发展，在传染病防控方面一直占据着重要地位。近年来，病原体检测技术日新月异，各地区新发蜱媒疾病时有发生，虽然我国一直致力于蜱传疾病的防控，但也存在许多地区和一些偏远地区少有关注以及缺乏监测情况，存在一定的蜱传疾病传播风险。蜱具有的宿主广泛、分布广泛、蜱种多样性的特点也提示我们对于蜱传病原体的发现只是冰山一角，蜱传疾病始终存在着巨大的隐患。因此我国需要加强对于蜱传疾病的监测，扩大监测范围，防〝患〞于未然。本次实验重点关注内蒙古地区，在内蒙古额尔古纳市、锡林浩特市、阿尔山市、阿日哈沙特口岸周边牧场、满洲里市、以及额布都格口岸6个区域针对蜱携带斑点热群立克次体情况进行调查。 目的： 进一步了解内蒙古地区蜱传斑点热群立克次体的感染情况，掌握媒介蜱携带SFGR的感染率、分布特点以及SFGR的遗传多样性情况，为该地区斑点热疾病的防控提供科学依据。 方法： 2019-2020年5-6月在内蒙古地区6个地区采用人工布旗法收集蜱，进行蜱以及蜱携带病原体的总DNA的提取，根据文献记载的SFGR特异性引物，采用巢式PCR的方法对SFGR外膜蛋白A（ompA）基因进行扩增，对阳性样本进行序列测定，测序结果经过CLC(MainWorkBenchV5.0软件)反向拼接处理，在MEGA7软件，采用最大似然法将具有代表性阳性标本与斑点热群立克次体参考序列一起构建分子系统进化树，其中Bootstrap设定为1000。统计学分析确定蜱携带斑点热群立克次体感染率与蜱种、地区、蜱雌雄之间的关系，率的比较采用?2检验，以P＜0.05判断差异具有统计学意义。 结果： 1.共采集了1404只成蜱，其中草原革蜱146只（10.4%）、森林革蜱523只（37.3%）、全沟硬蜱455只（32.4%），嗜群血蜱280只（20.0%）。 2.根据地点，随机对每个地区不同蜱种的蜱进行SFGR检测，其中检测的蜱包含额尔古纳地区530只，满洲里市19只、阿尔山市80只、锡林浩特市23只、阿日哈沙特口岸周边牧场10只、额布都格口岸33只，共计695只，测得SFGR总阳性率为37.7%。共检测出西伯利亚立克次体（Rickettsiasibirica）、黑龙江立克次体（Rickettsiaheilongjiangii）、拉欧蒂立克次体（Rickettsiaraoultii）新塔拉塞维奇立克次体(CandidatusRickettsiatarasevichiae)4种立克次体。拉欧蒂立克次体在该地区携带率最高，阳性率为26.6%，6个地区均有分布。 3.不同地区的SFGR分布存在差异。其中额尔古纳市分布的SFGR种类数最多，存在3种。统计学分析显示内蒙古地区各地区SFGR感染的阳性率差异与地域差异有一定的关系（X2=67.050，Plt;0.05），满洲里市感染率最高，阿日哈沙特口岸周边牧场次之。 4.不同蜱种SFGR感染的阳性率差异性与蜱的种类有关（X2=128.639，Plt;0.05），草原革蜱的阳性率高于其他3种蜱种，为81.1%，不同蜱种携带立克次体的数量与种类都不同，具有一定的特异性。草原革蜱与全沟硬蜱可携带2种SFGR，其余的蜱种只能携带1种SFGR。 5.不同性别之间的蜱，感染SFGR的差异性与性别无关（X2=0.042，Pgt;0.05）。 6.OmpA基因遗传进化显示:证实了4种立克次体的存在。与黑龙江、吉林、俄罗斯、蒙古国发现的斑点热群立克次体关系密切，同源性都在99.78%-100%。拉欧蒂立克次体的一大分支中后续分成了两个小分支，序列存在差异，可能是两种不同的株型，需进一步判断。其中额尔古纳地区的森林革蜱与全沟硬蜱、锡林浩特市的草原革蜱、阿尔山市的森林革蜱中均存在这两种不同的株型。XLHT-CY-10、EEGN-QG-60、EEGN-SL-100、AES-SL-30与拉欧蒂立克次体的Tomsk株、DnS14株、shangzhi-23株亲缘关系更近，而XLHT-CY-11、EEGN-QG-1、EEGN-SL-98、AES-SL-14与拉欧蒂立克次体M198株、M30株、DnS28株关系更为密切，聚为一小分支,同源性为99.78%-100%。 结论： 1.该地区具有蜱种多样性。4种蜱均是该地区优势蜱种，草原革蜱分布范围最广分布于5个地区。 2.该地区具有斑点热群立克次体遗传多样性，SFGR感染较为普遍。证实存在4种斑点热群立克次，与黑龙江、蒙古国、吉林、俄罗斯发现的立克次体关系密切。拉欧蒂立克次体基因型最为多见，是该地区流行株。 3.不同地区立克次体分布不同，种类也不相同，感染率也存在差异。满洲里市SFGR感染率最高，阿日哈沙特口岸周边牧场次之，有关部门应当加强防控。 4.SFGR感染率差异与蜱性别差异无关。 5.拉欧蒂立克次体在该地区存在遗传多样性。可能存在两种不同的株型在额尔古纳市、阿尔山市、锡林浩特市流行开来，额尔古纳市全沟硬蜱以及森林革蜱均可携带。
蜱;斑点热群立克次体;分子流行病学
承德医学院
硕士
病原生物学
许士奇
2021
中文
R183.5
2021-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）