高氏盆炎方三号方对慢性盆腔炎大鼠抗炎机制的研究及对生殖功能的影响
目的通过观察高氏盆炎方三号方对慢性盆腔炎模型大鼠行为学、病理学、炎症相关因子及核因子-κB(NF-κB)的影响，评价高氏盆炎方三号方治疗慢性盆腔炎的疗效，探讨治疗慢性盆腔炎的作用机制并观察对生殖功能的影响。 方法实验一：抗炎实验将60只昆明小雌鼠随机分为6组，每组10只，空白组、高氏盆炎方三号方高、中、低剂量组，蒲苓盆炎康颗粒组，人胎盘组织液组，给药7天，二甲苯试剂0.05ml/只致炎，取双侧耳片，计耳廓肿胀度和抑制率。 实验二：药效学实验和生殖功能实验将119只12周龄SD雌鼠随机分为两大组，药效学实验组(以下简称药效组)和生殖功能实验组(以下简称生殖组)，除空白组，其余大鼠均以机械损伤联合化学烧伤的方法造模(10天)，药效组每组10只，生殖组每组7只，分别分为7组，空白组、模型组、高氏盆炎方三号方高、中、低剂量组，蒲苓盆炎康颗粒组，人胎盘组织液组，除人胎盘组织液组为肌注给药外，其余各组均为灌胃给药，日1次，给药20天。1)药效组：观察大鼠的行为学、子宫形态学、组织病理学变化，ELISA检测各组大鼠血清GM-CSF、IL-4水平，免疫组化法和RT-PCR法检测子宫组织中NF-κB基因和蛋白的表达。2)生殖组：给药20天后，将生殖组大鼠按雌雄比7:2合笼，观察大鼠动情周期变化；记录孕鼠的一般情况；计算各组妊娠率、产仔数、平均产仔数、存活率。 结果1抗炎实验结果二甲苯小鼠致炎后，与空白对照组相比，高氏盆炎方三号方高、中、低剂量组均可显著抑制小鼠耳肿胀度(P<0.05)，减轻红肿等症状。 2药效学实验和生殖功能实验结果1)药效组结果(1)大鼠行为学：空白组大鼠未见行为学异常，模型组出现精神萎靡，反应迟缓，毛色萎黄无光，脱毛，食量少，阴道分泌物增多，后期部分大鼠出现排便不畅，腹部胀大。经给药治疗后大鼠行为学逐渐好转，其中高氏盆炎方三号方高、中剂量组大鼠基本恢复正常。 (2)组织形态学：①肉眼观察大鼠子宫组织形态：模型组大鼠子宫充血肿胀，管腔狭窄、变形，宫腔弹性差，与周围组织形成粘连或包裹较重，部分出现与肠管粘连，出现肠梗阻，双侧子宫较难分离；经给药治疗后高氏盆炎方三号方高、中、低剂量组不同程度改善。与模型组比较，给药组大鼠子粘连评分均明显降低(P<0.05)；②大鼠子宫肿胀度：与空白组相比模型组子宫肿胀明显(P<0.05)；与模型组比较，高氏盆炎方三号方高、中、低剂量组子宫肿胀度明显减轻(P<0.05)。③组织病理学：模型组大鼠子宫腔壁结构紊乱，腺体萎缩变形，可见炎细胞浸润，内膜充血水肿，变性坏死的上皮细胞，纤维增生。经给药治疗后，各给药组病理改变均有改善。④病理评分：与模型组比较，高氏盆炎方三号方高、中、低剂量组大鼠子宫组织病理评分均降低(P<0.05)。 (3)ELISA法检测大鼠血清GM-CSF、IL-4水平：模型组大鼠大鼠血清GM-CSF水平升高，血清IL-4水平降低(P<0.05)，与模型组相比，高氏盆炎方三号方高、中剂量组大鼠血清GM-CSF水平均明显降低，血清IL-4水平升高(P<0.05)；与蒲苓盆炎康颗粒组及人胎盘组织液组相比，高氏盆炎方三号方高剂量组大鼠血清GM-CSF水平均明显降低，血清IL-4水平升高(P<0.05)。 (4)免疫组化和RT-PCR检测大鼠子宫NF-κB蛋白和基因表达：模型组大鼠子宫NF-κB蛋白和基因表达明显升高(P<0.05)，与模型组比较，高氏盆炎方三号方高、中、低剂量组大鼠子宫组织NF-κB蛋白和基因表达均明显降低(P<0.05)；与蒲苓盆炎康颗粒组比较，高氏盆炎方三号方高剂量组NF-κB蛋白和基因表达明显降低(P<0.05)。 2)生殖组实验结果(1)动情周期变化：空白组大鼠在实验过程中直至受孕，其动情周期基本规律。造模后模型组和给药组部分大鼠出现动情周期紊乱。给药期间，模型组动情周期紊乱大鼠数量增加，与模型组相比，高氏盆炎方三号方高、中剂量组改善明显，紊乱率与模型组比较差异显著有统计学意义(P<0.05)。(2)对孕鼠一般情况影响：模型组大鼠均未受孕，给药组孕鼠精神状态较好，活动较灵活，毛色较光泽，饮水量增多，摄食量及体质量增长较快；(3)对生殖功能影响：模型组妊娠率明显下降，经高氏盆炎方三号方治疗后总妊娠率显著上升，且大鼠受孕率、产仔数、平均产仔数及子鼠存活率明显上升，与模型组相比高氏盆炎方三号方高、中、低剂量组受孕率明显升高(P<0.05)；高氏盆炎方三号方高、中剂量组平均产仔数增多(P<0.05)。 结论1高氏盆炎方三号方能够抑制二甲苯致小鼠耳肿胀度，具有显著抗炎作用。 2高氏盆炎方三号方能有效治疗慢性盆腔炎，其治疗疗效比较中药高剂量组>中药中剂量组>中药低剂量组；其中中药中剂量组与西药对照组人胎盘组织液组疗效相当，低剂量组与中成药对照组蒲苓盆炎康颗粒疗效相当。其发挥抗炎抗粘连作用机制可能与NF-κB信号通路干预有关，通过上调抗炎因子IL-4的水平，抑制NF-κB激活，下调炎症因子GM-CSF水平，控制盆腔炎症，防止粘连发生。 3高氏盆炎方三号方可改善大鼠的生殖功能，通过治疗盆腔炎症，抑制盆腔炎症进一步进展，修复因炎症造成的盆腔生殖功能的损伤，提高慢性盆腔炎大鼠受孕率及妊娠率，高氏盆炎方三号方各剂量组疗效优于中成药对照组蒲苓盆炎康颗粒，中剂量组与西药对照组人胎盘组织液组疗效相当。
慢性盆腔炎;高氏盆炎方三号方;粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子;白介素-4;核因子-κB;生殖功能
华北理工大学
硕士
中医妇科学
高慧;杨慧
2020
中文
R285.5
2021-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）