高氏盆炎方四号方对慢性盆腔炎大鼠抗炎作用及对免疫指标、MCP-1因子影响
目的实验一通过观察高氏盆炎方四号方对慢性盆腔炎模型大鼠一般情况、大鼠子宫变化、光镜下大鼠子宫组织形态学变化、血清中免疫相关因子含量、组织中炎症相关因子蛋白和基因表达的影响，探讨高氏盆炎方四号方对慢性盆腔炎大鼠抗炎作用机理。实验二观察高氏盆炎方四号方对三种盆腔炎常见致病菌的最小抑菌浓度。 方法实验一药效学实验从76只雌性SD大鼠中随机抽取10只作为空白组。余下66只采用苯酚凝胶化学烧伤联合机械损伤法制造大鼠慢性盆腔炎动物模型，10天后随机抽取6只大鼠取子宫组织评价造模成功，余60只随机分为模型组、高氏盆炎方四号方高(30g/kg)、中(15g/kg)、低(7.5g/kg)剂量组、蒲苓盆炎康颗粒组(3g/kg)、人胎盘组织液组(1ml/kg)，每组10只。给药期间，观察记录各组大鼠一般情况。连续给药20天后，处死大鼠，肉眼观察记录大鼠盆腔变化和子宫形态变化，剥离子宫组织，称取记录子宫湿重计算子宫肿胀度和子宫系数，进行HE染色，镜下观察记录大鼠子宫组织形态学改变，采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测大鼠血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM )、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH )、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)的含量，免疫组化法检测大鼠子宫组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白表达水平，实时荧光定量(RT-PCR)法检测大鼠子宫组织中MCP-1基因表达水平。数据采用SPSS25.0统计学软件进行分析处理。实验二抑菌实验观察高氏盆炎方四号方对慢性盆腔炎常见的致病菌：大肠杆菌、乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用。采用8×12孔U型无菌孔板微量肉汤稀释法进行高氏盆炎方四号方体外抑菌实验。将高氏盆炎方四号方水煎剂稀释10个浓度梯度，观察高氏盆炎方四号方分别对三种致病菌的最小抑菌浓度。 结果实验一1大鼠一般情况：模型组大鼠，精神状态异常，饮食饮水欠佳，大鼠体重增长趋势持平。各给药组随着给药天数增加，各组大鼠精神状态好转，饮食饮水量增多，体重增加。其中高氏盆炎方四号方高、中剂量组和胎盘组改善明显。2观察大鼠子宫变化：模型组大鼠左侧子宫形态均明显肿大，充血变形，充满大量积液，与周围组织大范围粘连。各组给药后，高氏盆炎方四号方高、中剂量组和胎盘组大鼠子宫改善显著。3子宫肿胀度及子宫系数结果：与模型组比较，各给药组子宫肿胀度及子宫系数均下降，差异有统计学意义(P<0.05)，其中高氏盆炎方四号方高、中剂量组和胎盘组改善显著。4光镜下观察大鼠子宫组织形态学变化：模型组大鼠子宫宫腔上皮破坏严重，大量炎性细胞浸润，肌层破坏，组织间粘连严重。各组给药后，均有改善，其中高氏盆炎方四号方高、中剂量组和胎盘组改善明显。5ELISA法观察大鼠血清中IgA、IgG、IgM、CRH、ACTH、CORT的含量，与模型组相比，高氏盆炎方四号方高、中、低剂量组大鼠血清中IgA、IgG、IgM含量升高，CRH、ACTH、CORT含量降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。6免疫组化法检测大鼠子宫组织中MCP-1蛋白表达水平，与模型组相比，高氏盆炎方四号方高、中、低剂量组MCP-1蛋白表达水平均下降，差异有统计学意义(P<0.05)。7RT-PCR法检测大鼠子宫组织中MCP-1基因表达水平，与模型组相比，高氏盆炎方四号方高、中、低剂量组基因表达水平均下降，差异有统计学意义(P<0.05)。实验二高氏盆炎方四号方对慢性盆腔炎的三种最常见致病菌大肠杆菌，乙型溶血性链球菌，金黄色葡萄球菌均有显著的抑制作用，最小抑菌浓度分别为：62.5mg/ml，125mg/ml，62.5mg/ml。 结论实验一高氏盆炎方四号方能有效抑制SD大鼠慢性盆腔炎炎症反应，改善盆腔和子宫炎性症状，提高血清中IgA、IgG、IgM含量，提高机体体液免疫，降低血清中CRH、ACTH、CORT含量，发挥免疫调节作用，显著降低MCP-1蛋白表达水平和基因表达水平，发挥抗炎作用。实验二高氏盆炎方四号方能在体外有效抑制慢性盆腔炎三种常见的致病菌：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌。
慢性盆腔炎;高氏盆炎方四号方;MCP-1因子
华北理工大学
硕士
中医妇科学
高慧;赵彦
2020
中文
R285.5
2021-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）