预防大鼠低压低氧脑损伤的葛根素鼻用温敏凝胶的研究
目的：制备葛根素温敏凝胶，通过鼻腔给药提高葛根素生物利用度和脑靶向性，用于预防低压低氧脑损伤。 方法：首先通过大鼠在体鼻腔灌流筛选葛根素及其衍生物中透鼻黏膜能力最强的药物，以丙二醇为溶剂、以泊洛沙姆407和泊洛沙姆188为基质制备载药凝胶。以胶凝温度和胶凝时间作为评价指标，采用正交实验设计优化处方。通过体外透析法考察药物的释放行为并通过释药方程模拟探究释放机制，通过Franz扩散池考察载药凝胶透黏膜吸收能力。采用流变仪考察温敏凝胶的胶凝温度及流变学性质，通过离体蟾蜍上颚黏膜纤毛毒性评价制剂安全性。考察葛根素温敏凝胶鼻腔给药后小鼠在急性减压缺氧条件下的携氧能力改变及死亡率。建立大鼠低压低氧脑损伤模型，通过行为学、脑组织病理及免疫组化染色评价葛根素温敏凝胶预防脑损伤的作用。利用液质联用技术，比较口服和鼻腔给药后大鼠血浆和组织分布，评价其脑靶向性。 结果：鼻腔灌流实验显示葛根素透鼻黏膜吸收能力最好。葛根素鼻用温敏凝胶最优处方为23%泊洛沙姆407，4%泊洛沙姆188和10%丙二醇，胶凝温度为34.3℃，胶凝时间为2.9min，适于鼻腔内给药。6h内，葛根素累积释放率及单位面积累积渗透量分别为55.5±6.0%和151.9±21.0μg/cm2，具有一定缓释作用，符合一级动力学方程。流变学试验表明，葛根素鼻用温敏凝胶模量与温度成正比，当高于30℃时，储能模量大于损耗模量，此时可形成黏附性较好的凝胶。在鼻腔温度（34℃）下，储能模量始终高于损耗模量，说明凝胶态能较好滞留于鼻腔。葛根素鼻用温敏凝胶可显著提高小鼠血液中红细胞数量和血红蛋白含量，增加携氧能力，并降低急性低压低氧条件下小鼠死亡率。通过低压氧舱成功建立稳定的大鼠低压低氧脑损伤模型。水迷宫实验表明，中、高剂量葛根素鼻用温敏凝胶可显著缩短低压低氧脑损伤大鼠逃避潜伏期，增加大鼠穿越平台次数，提高脑损伤大鼠学习记忆和空间探索能力。旷场实验表明，葛根素中、高剂量组脑损伤大鼠运动平均速度和直立次数显著增加，与模型组相比提高了大鼠自主探索能力。葛根素高剂量组可降低丙二醛含量减轻氧化应激，通过提高谷胱甘肽含量增加抗氧化能力。葛根素中、高剂量减轻了低压低氧条件下大鼠神经细胞损伤，下调缺氧诱导因子-1α表达。血浆药代动力学表明，与口服给药葛根素组相比，鼻腔给药葛根素温敏凝胶达峰时间缩短（口服给药Tmax=36±13.4min，鼻腔给药Tmax=10.0±5.7min），相对生物利用度是口服给药的300%。相同剂量下，口服给药组在脑中未检出葛根素，鼻腔给药组AUC为954.5±335.1h*ng/mL，说明鼻腔用葛根素温敏凝胶具有较好的脑靶向作用。 结论：本研究成功制备葛根素鼻用温敏凝胶，能提高葛根素的生物利用度和脑靶向作用，有效预防大鼠低压低氧脑损伤，将为急进高原等特殊环境下低压低氧脑损伤的预防提供新思路。
低压低氧脑损伤;葛根素;温敏凝胶;鼻腔给药;实验药理
山东中医药大学
硕士
药剂学
杜丽娜
2020
中文
R651.15;R285.5
2020-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）