安胰颗粒对重症急性胰腺炎大鼠NF--κBp65、TXA2/PGI2影响的实验研究
目的：研究安胰颗粒对重症急性胰腺炎(Severe Acute Pancreat itis，SAP)大鼠胰腺组织中核转录因子-κBp65(Nuclearfactor-kappaBp65，NF-κBp65)、环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2，COX-2)、血栓素A2(Thromboxane A2，TXA2)、前列环素(Prostacyclin，PG I2)及TXA2/PGI2比值的表达水平，探讨安胰颗粒治疗SAP改善胰腺微循环障碍的作用机制。 方法：将120只体重在200g-250g的雄性成年Sprague-Dawley(SD)大鼠，按照随机数字表的方法，分为四个组(每个组30只大鼠)，分别为正常组、模型组、西药组、中药组。每个组再按照3h、6h、12h分3个亚组(每个亚组10只大鼠)，分别为3h组、6h组、12h组。正常组大鼠组，可自由饮水，进食；模型组大鼠，造模前12h禁食，不禁水，将浓度为6％的左旋精氨酸(L-arginine)溶液(0.9％生理盐水配制)，按照150mg/100g的剂量注入大鼠腹腔内，此方法1次/小时，共注射3次，诱导大鼠SAP；西药组大鼠，造模前1小时，予重组人白介素10(Recombinant human interleukin-10，rhIL-10)进行腹腔注射(10000U/只)，再以模型组方法诱导SAP；中药组大鼠，予安胰颗粒灌胃，按照8g/kg的剂量(浓度1g/ml)，此方法1次/天，连续3天，再以模型组方法诱导SAP。以最后一次诱导SAP为时间点，在之后的3h、6h、12h，分批次将浓度为1%戊巴比妥钠溶液腹腔注射(50mg/kg)，待大鼠麻醉后处死，找到胰腺组织，将胰腺组织分为两部分，一部分放入4%的甲醛溶液中，做好标记，用于病理切片的制备、免疫组化NF-κBp65、COX-2的累积光密度值(Integrated Optical Density ， IOD )检测；另一部分用磷酸缓冲液(Phosphate buffered saline ， PBS )去除组织表面的血液，置于0.9%NaCL1.5ml的EP管中，经匀浆机处理后，放入离心管内，做好标记，置于离心机中，以3000r/min，离心10min，取血清，-20℃冰箱保存，应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)测定胰腺组织TXA2和PGI2含量。 所有数据均以(-x±s)。满足正态分布且方差齐时采用单因素方差分析比较均数间的差异，LSD-t检验进行均数的多重比较。不满足正态分布或方差不齐时用秩和检验并作组间多重比较。检验水准按α=0.05，P＜0.05表示差异有统计学意义。 结果： (1)胰腺组织病理：正常组胰腺小叶结构正常，小叶内腺泡、导管、排列规则，可见点状细胞核，未见病理性变化。模型组胰腺小叶结构紊乱，炎性细胞浸润，小叶内导管扩张，腺泡细胞水肿，可见散在坏死点，间质小血管壁出血坏死，细胞轮廓模糊。西药组胰腺小叶结构完整，腺泡细胞可见水肿，间质小血管壁局部可见不同程度的出血坏死，与模型组比较，病变程度明显减轻。中药组胰腺小叶结构稍紊乱，小叶导管扩张，腺泡细胞水肿，可见肿胀的细胞核，随时间推移，腺泡及间质可见局部出血坏死，与模型组比较，病变程度较轻。 (2)各组大鼠胰腺组织NF-κBp65的IOD值结果：与正常组比较，其余各组大鼠胰腺组织NF-κBp65的IOD值在各时间点显著升高(P＜0.01)；与模型组比较，西药组和中药组各时间点大鼠胰腺组织NF-κBp65的IOD值均明显降低(P＜0.01)；西药组和中药组各时间点比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 (3)各组大鼠胰腺组织COX-2的IOD值结果：与正常组比较，其余各组大鼠胰腺组织COX-2的IOD值在各时间点有明显增加(P＜0.01)；与模型组比较，西药组和治疗组组各时间点胰腺组织COX-2的IOD值表达显著降低(P＜0.01)；西药组和中药组各时间点比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 (4)各组大鼠胰腺组织TXA2、PGI2的含量结果：与正常组比较，其余各组大鼠胰腺组织TXA2、PGI2的含量在各时间点显著升高(P＜0.01)；与模型组比较，西药组和中药组胰腺组织TXA2、PGI2的含量明显降低(P＜0.01)；与西药组比较，中药组胰腺组织TXA2、PGI2的含量在各时间点差异无统计学意义(P＞0.05)。 (5)各组大鼠胰腺组织TXA2/PGI2比值结果：与正常组比较，模型组大鼠胰腺组织TXA2/PGI2比值均数显著升高(P＜0.01)；与模型组比较，西药组和中药组胰腺组织TXA2/PGI2比值均数明显降低(P＜0.01)；西药组和中药组各时间点比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论： (1)安胰颗粒能减轻重症急性胰腺炎大鼠胰腺的损伤，对胰腺起保护作用。 (2)安胰颗粒能通过降低SAP大鼠胰腺组织NF-κB和COX-2表达，调节TXA2/PGI2比值，减轻炎症介导的微血管引起的损伤，进而改善胰腺组织微循环障碍，达到保护胰腺的目的。
重症急性胰腺炎;安胰颗粒;NF-κBp65;COX-2;TXA2/PGI2
广西中医药大学
硕士
中西医结合临床
雷力民
2020
中文
R576
2020-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）