OBP--4抗艰难梭菌活性评价及其在大鼠体内的药物代谢动力学研究
OBP-4是一个新的具有优异抗菌活性和良好安全性的噁唑烷酮-喹诺酮杂合物，本研究评价了OBP-4对艰难梭菌（C.difficile）的体内外抗菌活性，OBP-4在大鼠体内的吸收、分布、代谢、排泄（ADME）特征以及OBP-4对大鼠CYP450酶的影响，主要结果如下： 1、分别采用琼脂稀释法和艰难梭菌感染（CDI）小鼠模型对OBP-4抗艰难梭菌的体内外活性进行了评价。结果显示，OBP-4对艰难梭菌具有很好的抗菌活性（MICs，0.25-1mg/L），且在0.5×MIC浓度下能完全抑制艰难梭菌（ATCC BAA-1803）芽孢的形成；在小鼠CDI模型中，连续5天口服10mg/kg的OBP-4对感染小鼠具有完全的保护作用，存活率为100%，且停药后无复发现象，而万古霉素和咔哒唑胺治疗的小鼠均有复发，表明OBP-4的疗效优于对照药物。 2、建立了测定大鼠生物样品中OBP-4的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）分析方法，并对该方法进行了确证。结果显示，该方法专属性良好、灵敏度高；线性浓度范围为1/2-1000ng/mL（R2＞0.99）；各生物样品中OBP-4的提取回收率均大于85.2%，基质效应不明显；日内、日间精密度均小于9.7%，准确度在-9.5-9.0%之间；且OBP-4在不同的处理条件下稳定性良好。 3、利用建立的LC-MS/MS方法对OBP-4在大鼠体内的吸收、组织分布和排泄进行了研究。结果显示，OBP-4（5mg/kg、10mg/kg和20mg/kg）口服给予大鼠后，吸收和消除较快，生物利用度极低，且在5-20mg/kg剂量范围内具有一个非线性的药代动力学特征；大鼠单次口服10mg/kg的OBP-4后，以小肠中OBP-4浓度为最高，其次为胃，而心脏、肝脏、肺脏、肾脏中OBP-4的暴露量极低，脾脏和脑中并未检测到OBP-4；在大鼠单次口服OBP-4后，OBP-4主要以原型的形式从粪便排出（92.8%），尿液中的OBP-4回收率仅占0.015%。 4、利用LC-MS/MS方法对OBP-4的体内外代谢稳定性进行研究。结果显示，OBP-4在体外与大鼠肝微粒体（RLM）共孵育90min后，几乎不发生代谢；OBP-4静脉给予大鼠后，在大鼠血浆、尿液和粪便样品中共检测到两个Ⅱ相代谢物M1和M2；M2仅能在大鼠粪便中检测到，而M1在大鼠血浆、尿液和粪便中均能检测到；且血浆和尿液中M1的相对比例明显高于OBP-4，而粪便中主要为OBP-4，M1和M2的相对比例很低。 5、建立了一种快速可靠且能同时测定大鼠血浆中非那西汀、奥美拉唑、睾酮、甲苯磺丁脲和氯唑沙宗的LC-MS/MS分析方法，并利用该方法研究了OBP-4对大鼠细胞色素P450酶（CYP450）的影响。结果显示，低剂量的OBP-4能诱导CYP1A2的活性，而高剂量的OBP-4反而抑制其活性，但均不显著；对于CYP2D1，低、高剂量的OBP-4均表现出了轻微的诱导作用；对于CYP2C11和CYP2E1，低、高剂量的OBP-4均表现出了轻微的抑制作用，且呈剂量依赖性。 综上所述，OBP-4对艰难梭菌具有良好的体内外抗菌活性，同时也呈现了一个有利的药代动力学特征，这些特性有利于其作为抗CDI候选药物的进一步研发。
噁唑烷酮-喹诺酮杂合物;艰难梭菌;抗菌活性;药物代谢动力学
中国农业科学院
博士
基础兽医学
张继瑜
2019
中文
R978
2020-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）