EphA2通过调控Grb2表达参与肝癌细胞侵袭的机制研究
目的：检测促红细胞生成素肝细胞受体A2(EphA2)蛋白在肝细胞肝癌中的表达及其参与调控肝癌细胞侵袭的可能机制。 方法：培养人肝细胞HL-7702和肝癌细胞株MHCC97H、Hep3B,采用siRNA干扰法抑制肝癌细胞中EphA2、生长因子受体结合蛋白2（Grb2）的表达，设立未处理组（未处理肝癌细胞），对照组（加入对照siRNA）和siRNA干扰组（加入siRNA干扰EphA2或Grb2），Western blot法检测不同处理前后细胞中EphA2、Grb2蛋白的表达情况，Transwell小室检测细胞侵袭性。 结果：体外侵袭实验结果显示MHCC97H、Hep3B、HL-7702穿透细胞的数量分别为：（401±3）/10HPF、（111±4）/10HPF、（31±3）/10HPF，人正常肝细胞与人肝癌细胞相比具有统计学意义（P＜0.05），EphA2、Grb2蛋白在人正常肝细胞与人肝癌细胞中的相对表达量相比，差异均有统计学意义（P＜0.05）；siRNA抑制EphA2表达后，Hep3B和MHCC97H细胞系未处理组、对照组、siRNA干扰组穿透的细胞数量分别为：（111±4）/10HPF、（108±5）/10HPF、（53±3）/10HPF和（405±5）/10HPF、（399±4）/10HPF、（155±7）/10HPF，siRNA干扰组与对照组比较，差异有统计学意义(t＝16.5，54.6，P＜0．001)，EphA2蛋白在Hep3B、MHCC97H细胞系未处理组、对照组、siRNA干扰组中的相对表达量siRNA干扰组与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)；siRNA抑制Grb2表达后，Hep3B和MHCC97H细胞系未处理组、对照组、siRNA干扰组穿透的细胞数量分别为：（109±3）/10HPF、（107±4）/10HPF、（56±4）/10HPF和（403±4）/10HPF、（402±4）/10HPF、（163±5）/10HPF，siRNA干扰组与对照组比较，差异有统计学意义(t＝16.9，67.2，P＜0.001)，Grb2蛋白在Hep3B和MHCC97H细胞未处理组、对照组、siRNA干扰组组中的相对表达量siRNA干扰组与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)；siRNA抑制EphA2表达后，Grb2蛋白在Hep3B、MHCC97H细胞未处理组、对照组、siRNA干扰组中的相对表达量siRNA干扰组与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论：EphA2可能通过调控Grb2蛋白的表达进而来参与调控肝癌细胞的侵袭，据此，EphA2可作为治疗肝细胞肝癌的新靶点。
肝细胞肝癌;肿瘤侵袭;促红细胞生成素肝细胞受体A2;生长因子受体结合蛋白2
西安医学院
硕士
外科学
马庆久
2020
中文
R735.7;R730.23
2020-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）