TGF--β1/Smad信号通路介导的上皮间叶转化在桥本氏甲状腺炎纤维化过程中的作用和机制研究
目的： 探讨TGF-β1/Smad信号通路介导的上皮间叶转化在桥本氏甲状腺炎（HT）纤维化过程中的作用机制；在体外组织学和细胞学实验基础上，探讨上皮间叶转化（EMT）相关标志物和TGF-β1/Smad信号通路蛋白在桥本氏甲状腺炎发生发展过程中的表达和作用，并分析其与临床病理学特征之间的关系，为深入研究TGF-β1/Smad信号通路调控桥本氏甲状腺炎上皮间叶转化的作用机制奠定基础，为阻断乃至逆转桥本氏甲状腺炎纤维化的治疗提供理论依据。 方法： 1、运用免疫组织化学方法检测47例桥本氏甲状腺炎手术切除标本构成的组织切片，进行病理分型，并检测EMT相关蛋白与TGF-β1/Smad信号通路蛋白在桥本氏病组织中的表达，分析蛋白之间的相关性及与桥本氏病中滤泡上皮细胞发生上皮间叶转化的关系。 2、用不同浓度的rh-TGF-β1细胞因子刺激及TGF-β1/Smad信号通路的抑制剂rh-BMP7细胞因子刺激正常甲状腺滤泡上皮细胞Nthyori-31，用倒置显微镜观察记录细胞形态的变化，用实时荧光定量PCR和Western Blot方法检测TGF-β1/Smad信号通路标志物和EMT标志物的表达水平变化。 结果： 1、免疫组化检测桥本氏甲状腺炎中典型HT和纤维化亚型FVHT中TGF-β1的阳性表达率有显著差异（x2=17.92，p＜0.01），FVHT组织中TGF-β1的阳性表达率明显高于典型HT，桥本氏甲状腺炎中Smad2/3的表达和TGF-β1的表达是一致的(Kappa=0.783，p＜0.05)。桥本氏甲状腺炎中E-cadherin的表达明显降低，Vimentin的表达明显升高，两者呈负相关关系（Person列联系数r=0.549，p＜0.05）。桥本氏甲状腺炎中E-cadherin的表达降低与TGF-β1的阳性表达无相关关系（r=0.024，p＞0.05），Vimentin的表达增高与TGF-β1的阳性表达呈正相关（r=0.282，p＜0.05）。 2、用不同浓度rh-TGF-β1处理Nthyori-31细胞，可诱导细胞发生由上皮细胞到间叶细胞的形态学改变，实时荧光定量PCR检测细胞Vimentin、α-SMA、Smad2、Smad3和Smad4的RNA水平显著上调，E-cadherin和Smad7的水平显著下调。用rh-TGF-β1和rh-BMP7同时处理细胞，经实时荧光定量PCR和Western Blot检测，发现BMP7可抑制TGF-β1诱导的Vimentin、α-SMA、Smad2、Smad3和Smad4的表达水平升高及E-cadherin和Smad7的表达水平下降。 结论： 1、桥本氏甲状腺炎中普遍存在上皮间叶转化（EMT）现象，但尚不能认为此EMT现象与TGF-β1的阳性表达有关。FVHT与典型HT相比，TGF-β1和Smad2/3都有较高的阳性表达率，说明TGF-β1/Smad通路在桥本氏甲状腺炎纤维化过程中发挥了重要作用。 2、TGF-β1可以通过TGF-β/Smad信号转导通路诱导正常甲状腺滤泡上皮细胞系Nthyori-31发生上皮间叶转化。
桥本氏甲状腺炎纤维化;上皮间叶转化;信号通路;临床病理
泰山医学院
硕士
病理学与病理生理学
王学春
2016
中文
R581.402
2020-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）