邻苯二甲酸二异壬酯经皮暴露对BALB/c小鼠特应性皮炎的影响
目的： 通过DNCB诱导和激发来建立小鼠AD模型，研究DINP对DNCB诱导的BALB/c小鼠AD的影响及机制。 方法： 应用DNCB反复背部致敏和耳部激发可建立小鼠特应性皮炎模型。使用数显卡尺测量小鼠耳厚度，计算小鼠耳厚度差。通过HE染色观察小鼠皮损部位的皮肤结构改变和炎症细胞浸润。通过甲苯胺蓝染色观察小鼠皮损部位的肥大细胞数目和脱颗粒。通过免疫组化来衡量小鼠皮损部位TSLP的表达状况。使用ELISA法测量小鼠血清中IgE、IL-4、IFN-γ、IL-31的水平。 结果： 1.小鼠体重比较：实验前小鼠体重为13.598±0.928g，差异无统计学意义（F=0.041,P=0.997）；实验后小鼠体重为control组（19.638±1.003g），model组(19.450±0.845g)，4(19.550±0.996g)、40(19.400±0.953g)、400mg/kg/day DINP+DNCB组(19.088±0.849g)，五组差异无统计学意义（F=0.405,P=0.804）。可认为DINP暴露对小鼠体重无显著性影响。 2.耳部变化比较：control组右耳无变化。DNCB组和4mg/kg/day DINP+DNCB组右耳发红。40mg/kg/day DINP+DNCB组和400mg/kg/day DINP+DNCB组右耳出现明显的干燥、脱屑、浆痂，周围毛发脱落。 3.耳厚度差比较：control组（0.001±0.025mm），DNCB组（0.171±0.038mm），4(0.203±0.035mm)、40(0.300±0.056mm)、400mg/kg/day DINP+DNCB组（0.363±0.048mm）五组差异有统计学意义（F=87.633,P?0.001）。可认为五组小鼠耳厚度差不全相同。两两比较结果显示，DINP的暴露导致小鼠耳厚度差增加，且呈剂量依赖性。 4.脾指数的比较：control组（3.660±0.256mg/10g），DNCB组（3.916±0.483mg/10g），4(3.971±0.353mg/10g)、40(4.337±0.482mg/10g)、400mg/kg/day DINP+DNCB组（4.387±0.435mg/10g）五组差异有统计学意义（F=4.401,P=0.005）。可认为五组小鼠脾指数不全相同。两两比较结果显示，400mg/kg/day的DINP暴露增加小鼠脾指数，4和40mg/kg/day的DINP暴露对小鼠脾指数无显著性影响。 5.耳部HE染色比较：control组无明显改变。DNCB组可见少量炎细胞浸润。随着DINP暴露的增加，炎细胞浸润加剧。 6.耳部甲苯胺蓝染色比较：肥大细胞总数和脱颗粒数分别为：control组（10.417±2.742,2.375±0.667）、DNCB组（16.875±3.673,3.458±0.689）、4(16.167±4.612,2.458±0.796)、40(25.792±4.102,4.667±0.777)、400mg/kg/day DINP+DNCB组(35.417±5.418,6.917±1.257)。对于肥大细胞总数，五组差异有统计学意义（F=43.316,P?0.001）。可认为五组肥大细胞总数不全相同。两两比较结果显示，4mg/kg/day的DINP暴露使肥大细胞总数略有降低，但无显著性影响，而40和400mg/kg/day的DINP暴露使肥大细胞总数增加。对于肥大细胞脱颗粒数，五组差异有统计学意义（F=38.044,P＜0.001）。可认为五组肥大细胞脱颗粒数不全相同。两两比较结果显示，4mg/kg/day的DINP暴露使肥大细胞脱颗粒数明显减少，而40、400mg/kg/day的DINP暴露使肥大细胞脱颗粒数显著增加。 7.耳部TSLP累计光密度值比较：control组（280.292±86.57）、DNCB组（1515.625±364.113）、4(1129.500±135.550)、40(5042.542±810.476)、400mg/kg/day DINP+DNCB组（5974.417±751.653）五组差异有统计学意义（χ2=35.488,P＜0.001）。可认为五组TSLP不全相同。两两比较结果显示，4mg/kg/day DINP暴露组TSLP表达减少，40和400mg/kg/day DINP的暴露使TSLP表达增加。 8.血清IgE比较：control组（2.455±0.228U/ml）、DNCB组（3.592±0.375U/ml）、4(3.500±0.364U/ml)、40(4.160±0.390U/ml)、400mg/kg/day DINP+DNCB组（4.412±0.423U/ml）五组差异有统计学意义（F=34.876,P＜0.001）。可认为五组血清IgE不全相同。两两比较结果显示，4mg/kg/day的DINP暴露未导致血清IgE的明显变化，而40和400mg/kg/day的DINP暴露导致IgE的明显增加。 9.血清IL-4比较：control组（7.363±0.690ng/L）、DNCB组（8.243±0.940ng/L）、4(8.334±0.859ng/L)、40(9.081±0.869ng/L)、400mg/kg/day DINP+DNCB组（9.429±0.841ng/L）五组差异有统计学意义（F=7.266,P＜0.001）。可认为五组血清IL-4不全相同。两两比较结果显示，4、40、400mg/kg/day DINP导致IL-4含量升高。 10.血清IFN-γ比较：control组（183.134±8.969pg/ml），DNCB组（175.481±13.383pg/ml），4(175.153±13.039pg/ml)、40(170.051±12.180pg/ml)、400mg/kg/day DINP+DNCB组（167.892±12.632pg/ml）五组差异无统计学意义（F=1.888,P=0.134）。尚不能认为五组血清IFN-γ含量不同。 11.血清IFN-γ/IL-4比较：control组（24.970±1.305），DNCB组（21.421±1.692），4(21.175±2.327)、40(18.846±1.951)、400mg/kg/dayDINP+DNCB组（17.885±1.560）五组差异有统计学意义（χ2=26.045,P?0.001）。可认为五组比值不全相同。两两比较结果显示，4mg/kg/day DINP使IFN-γ/IL-4比值升高，但无显著性；40和400mg/kg/day的DINP暴露导致比值显著降低。 12.血清IL-31比较：control组（8.737±0.571ng/L），DNCB组（9.236±0.857ng/L），4(9.509±0.648ng/L)、40(10.880±1.243ng/L)、400mg/kg/dayDINP+DNCB组（11.891±0.919ng/L）五组差异有统计学意义（F=17.455,P＜0.001）。可认为五组血清IL-31不全相同。两两比较结果显示，40和400mg/kg/day的DINP暴露组导致血清IL-31明显升高。 结论： 1.应用DNCB反复背部致敏和耳部激发可建立小鼠特应性皮炎模型。 2.40和400mg/kg/day的DINP暴露会加重DNCB诱导的小鼠皮炎。 3.Th1/Th2失衡是DINP加重DNCB诱导小鼠皮炎的重要免疫学机制。
特应性皮炎;邻苯二甲酸二异壬酯;经皮暴露;病理机制
泰山医学院
硕士
流行病与卫生统计学
张钦凤;王佳
2019
中文
R751.02
2020-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）