DON毒素、DON联合T--2毒素对大鼠CYP2E1酶含量及活性的影响
研究目的: 通过观察DON毒素和“DON+T-2”毒素对大鼠肝脏CYP2E1酶含量和活性的影响及其对肝脏、肾脏、食管和肠道等组织器官的损伤作用，探讨真菌毒素在生物体内的代谢途径和特征。 研究方法: 选取4周龄Wistar大鼠幼鼠30只，按照完全随机化方法分为DON毒素组、“DON+T-2”组、空白组。染毒方式为模拟自然进食状态，将毒素掺入饲料中，DON组毒素含量为0.33μg/g，“DON+T-2”组为DON毒素为0.22μg/g，T-2毒素为0.1μg/g，空白组食用等量的常规固体颗粒饲料。对幼鼠分两个阶段喂养，分别为15天和30天，将大鼠处死后，取其肝脏，制备肝微粒体，通过酶联免疫吸附剂测定法（ELISA法）对大鼠肝微粒体CYP2E1酶含量及活性进行检测。剖解大鼠，分别取肝脏、肾脏、肠、食管等组织器官，制作石蜡切片，采用HE染色法进行染色。实验数据通过采用SPSS20.0的统计软件包来做统计分析。实验数据用算术均数及标准差（(x)±s）表示，采用线性回归的统计方法，对DON毒素组和空白对照组之间采用t检验的方法进行两组之间的比较；DON毒素组、“DON+T-2”组和空白对照组之间采用单因素方差分析的方法进行比较；进一步比较DON毒素组、“DON+T-2”组和空白对照组两两之间是否存在统计学意义，采用LSD检验法；按P≤0.05有统计学意义作为检验水准。 研究结果: 1．临床症状 空白对照组大鼠的一般生活状况较好，并未出现呕吐等其他症状。DON毒素组和“DON+T-2”组大鼠采食量下降，体重减轻，活动度减少，被毛不整，喜趴卧，运动失调，反应迟钝，粪便稀稠等症状。 2．CYP2E1酶含量检测结果 染毒15天后，空白对照组CYP2E1含量为6.052±0.124(ng/ml)，DON组为3.595±0.152(ng/ml)。染毒30天后，空白对照组CYP2E1含量为4.511±0.137(ng/ml)，DON组为2.936±0.093(ng/ml)，联合组为2.484±0.149(ng/ml)。 3．CYP2E1酶活性检测结果 染毒30天后，空白对照组CYP2E1活性为3.541±0.070(U/ml)，DON组为3.318±0.047(U/ml)，“DON+T-2”毒素组为3.229±0.016(U/ml)。 4.组织病理学变化 对大鼠进行剖检后发现，DON毒素组大鼠肾脏出现肿大现象，而且有大小不一的白色坏死灶出现在肝脏的表面，空白对照组大鼠脏器并未发现明显变化。组织病理变化正常空白组大鼠肝血窦排列正常，肝细胞结构完好，细胞核大而圆，组织结构正常，核仁明显，胞质丰富，多呈现嗜碱性；DON毒素组光镜下可见大量的肝细胞细胞质浅染，胞浆内出现粉红色物质；“DON+T-2”毒素组肝细胞出现局灶性水肿、坏死，并可见部分肝细胞核固缩、深染，有炎性细胞浸润出现在血管周围，并可见血管套现象，胞浆内出现不规则空泡。空白对照组肾脏，在视野中可见肾小球结构正常，肾小管上皮细胞核呈圆形，位于细胞的基底部，整齐排列，没有出现明显的病理变化；DON毒素组肾视野中能看到蛋白管型，部分肾小管管腔内可见粉红色蛋白黏液渗出；“DON+T-2”毒素组肾视野中可见蛋白管型，部分肾小管管腔内有粉红色蛋白黏液渗出，部分肾小球囊腔内也可看到粉红色蛋白滴液。空白对照组食管未见明显的病理变化；DON毒素组视野中可见食管上皮出现角化过度，角质层变厚，而且有鳞状上皮化生；“DON+T-2”毒素组可见食管上皮角化过度，角质层增厚，食管壁增厚，有明显的鳞状上皮增生。空白对照组大鼠肠道没有明显变化；DON毒素组视野中出现了肠黏膜下层的水肿，间隙增大，部分肠腺上皮细胞也出现水肿；“DON+T-2”毒素组可见肠黏膜固有层水肿，细胞间隙增大，部分肠黏膜上皮细胞坏死脱落。 研究结论: 1.进行染毒15天后，与空白对照组大鼠相比，DON毒素组可导致大鼠体内肝CYP2E1酶含量的下降。结果说明DON毒素对肝细胞产生毒性效应，使肝脏产生损伤作用，肝脏代谢功能减弱，肝代谢酶受损，表现为CYP2E1酶含量的降低。 2.进行染毒30天后，与空白对照组大鼠相比，DON毒素组大鼠体内肝CYP2E1酶含量及活性下降；“DON+T-2”毒素组CYP2E1酶含量及活性明显下降。与DON毒素组相比，“DON+T-2”毒素组CYP2E1酶含量及活性出现一定程度的下降。结果说明DON毒素对肝细胞的毒性作用，使肝脏产生了损伤，肝脏代谢功能减弱，肝代谢酶受损，表现为CYP2E1酶含量及活性的降低。“DON+T-2”毒素组CYP2E1酶含量及活性比DON毒素组有所下降，可能是DON毒素和T-2毒素产生了协同作用或相加作用，增大了对肝脏的损伤作用。 3.组织病理学显示，与对照组肝脏相比，DON毒素组视野中可见大量的肝细胞质浅染，胞浆内可见粉红色物质；“DON+T-2”毒素组肝细胞局灶性水肿坏死，并可见部分肝细胞核固缩、深染，炎性细胞浸润在血管周围，并可见血管套现象，胞浆内可见不规则空泡。与对照组肾脏相比，DON毒素组和“DON+T-2”毒素组视野中可看到蛋白管型，部分肾小管管腔内有粉红色蛋白黏液渗出；“DON+T-2”毒素组还可看到部分肾小球囊腔内出现粉红色蛋白滴液。与空白对照组相比，DON毒素组和“DON+T-2”毒素组视野中可见食管上皮角化过度，角质层变厚，食管壁增厚，而且有鳞状上皮增生，“DON+T-2”毒素组鳞状上皮增生明显。与空白对照组相比，DON毒素组和“DON+T-2”毒素组视野中出现肠黏膜下层水肿，间隙变大，部分肠腺上皮细胞发生水肿。此外，“DON+T-2”毒素组可看到部分肠黏膜上皮细胞出现坏死脱落现象。
呕吐毒素;T-2毒素;酶含量;生物活性;毒性机理
泰山医学院
硕士
流行病与卫生统计学
李群伟
2019
中文
R992
2020-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）