MicroRNA--142在肾癌中的临床意义及生物学作用研究
目的: 探索microRNA-142在肾癌中的表达水平、临床意义以及作用机制。 方法: 1)利用TCGA数据库筛选出肾癌中失调的microRNAs,检测miR-142表达情况。2)利用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR,quantitative realtimepolymerasechainrea ction)检测miR-142在肾癌标本、正常组织、肾癌细胞系中的表达情况,以及与肾癌临床参数之间关系。3)利用miR-142inhibitor转染肾癌细胞系Caki-1和786-O。4)利用CCK-8检测miR-142对肾癌细胞系增殖的影响。5)利用克隆形成实验检测miR-142对肾癌细胞系克隆形成的影响。6)利用免疫组化(Immunohistochemistry)和蛋白印迹(Western blot)实验检测APC(adenomatous polyposiscoli)在肾癌组织及肾癌细胞系中表达的变化。8)利用荧光素酶报告基因实验(Luciferase report)检测miR-142与APC3'-UTR结合情况。 结果: 1)在TCGA数据库中的31例肾癌及癌旁组织对比发现miR-142明显增高。2)从62例肾癌组织与30例正常组织的对比发现miR-142在肿瘤组织中表达明显增高,并且与肿瘤分期分级有关(P<0.05)。3)肾癌细胞系转染miR-142inhibitor后,能明显抑制Caki-1和786-O的miR-142的表达(P<0.05)。4)转染miR-142inhibitor后肾癌细胞系Caki-1和786-O增殖能力和克隆形成明显减弱(P<0.05)。5)APC在肾癌组织中表达明显降低(P<0.05)。6)miR-142能明显抑制APC蛋白水平的表达。 结论: miR-142在肾癌中表达上调,并与临床分期分级有关。miR-142可靶向调控APC的表达来促进肾癌增殖与克隆形成。
肾癌;微小核糖核酸-142;蛋白表达;细胞增殖
泰山医学院
硕士
泌尿外科学
郭丰富
2016
中文
R737.11
2020-10-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)