几种传统中草药成分的分离及含量测定
药物主成分的测定、杂质的分析、药物品质测试等都离不开定量工作，因此定量分析是必不可少的内容。随着科学技术的迅速发展，现代分析测试技术和设备仪器的迅猛发展，衍生出了各式各样的检测技术，如气相色谱法、高效液相色谱法、离子交换树脂法等。而毛细管电泳法以其较高的分离效率，较短的分析时间，较低的成本消耗等特点成为目前应用比较广泛的检测技术之一，是解决各自领域中一些新问题的得力工具。本文以响应曲面法优化了旋覆花、通经草、罗布麻、刺五加等中草药中各自几种成分的毛细管电泳分离条件，并对样品中的部分成分进行了含量测定，为其质量评价提供了新方法。 目的： 1.采用响应曲面法优化芦丁、槲皮苷和绿原酸的毛细管电泳分离条件，建立了一种毛细管电泳分析旋覆花中芦丁、槲皮苷和绿原酸的方法。为进一步开发利用旋覆花中草药资源提供一定的参考依据。 2.采用响应曲面法优化芦丁和异槲皮苷的毛细管电泳分离条件，建立了一种毛细管电泳分析芦丁和异槲皮苷的方法。利用该方法对不同产地通经草样品中芦丁和异槲皮苷进行了测定。 3.采用响应曲面法优化刺槐素和染料木素的毛细管电泳分离条件，建立了一种毛细管电泳法分析罗布麻中刺槐素和染料木素的方法。为进一步开发和利用罗布麻中草药资源提供一定新方法。 4.建立了分散液液微萃取-毛细管电泳法测定中药刺五加中大豆苷元和槲皮素的方法。以乙酸乙酯为萃取剂、乙腈为分散剂，采用分散液液微萃取技术对大豆苷元和槲皮素进行分离提取，并结合毛细管电泳法进行测定。此法应用于市售中草药刺五加中大豆苷元和槲皮素的分析，取得了较满意的结果。 方法： 1.旋覆花中芦丁、槲皮苷和绿原酸的毛细管电泳分离条件如下：以30mmol/L硼砂-0.5mol/L硼酸-4.37mmol/LBMIM-PF6(pH 9.0)作为工作缓冲溶液，工作电压为16kV，压差进样(高度为11.5cm)，进样时间为20s，检测波长为354nm。 2.通经草中芦丁和异槲皮苷的毛细管电泳分离条件如下：以23mmol/L硼砂-1.0mol/L硼酸-5.34mmol/LBMIM-PF6(pH 8.7)作为工作缓冲溶液，工作电压为18kV，压差进样(高度为11.5cm)，进样时间为15s，检测波长为354nm。 3.罗布麻中刺槐素和染料木素的毛细管电泳分离条件如下：以35mmol/L硼砂-1.0mmol/L硼酸-10mmol/Lα-环糊精(pH 9.0)作为工作缓冲溶液，工作电压为11kV，压差进样(高度为11.5cm)，进样时间为15s，检测波长为214nm。 4.刺五加中大豆苷元和槲皮素的毛细管电泳分离条件如下：以25mmol/L硼砂-1.0molL硼酸(pH 9.0)为工作缓冲溶液，工作电压为16kV，压差进样(高度为11.5cm)，进样时间为5s，检测波长为214nm。以77μL乙酸乙酯为萃取剂、980μL乙腈为分散剂，采用分散液液微萃取技术对大豆苷元、槲皮素进行提取分离。 结果： 1．在优化的条件下，旋覆花中的芦丁、槲皮苷和绿原酸在10min内得到良好分离。其峰面积和浓度分别在2-100，2-250和2-200mg/L范围内呈良好线性关系。芦丁、槲皮苷和绿原酸的检出限分别为0.6，0.6和0.5mg/L。方法用于分析旋覆花样品并做加标回收试验，芦丁、槲皮苷和绿原酸的回收率分别为102.6±2.7%、97.4±4.1%和97.2±3.8%。 2．在优化的条件下，通经草中的芦丁和异槲皮苷在10min内得到良好分离。其峰面积和浓度分别在2-200、2-250mg/L范围内呈良好线性关系。两者的检出限分别为0.6，0.4mg/L。方法用于分析通经草样品并做加标回收试验，芦丁和异槲皮苷的回收率分别为107.9±4.6%和102.4±4.8%。 3．在优化的条件下，罗布麻中的刺槐素和染料木素在10min内得到良好分离。其峰面积和浓度分别在2-200、2-400mg/L范围内呈良好线性关系。刺槐素和染料木素的检出限分别为0.7和0.5mg/L。方法用于分析罗布麻样品并做加标回收试验，刺槐素和染料木素的回收率分别为102.9±3.9%和100.6±4.8%。 4．采用分散液液微萃取对刺五加中的大豆苷元和槲皮素进行提取分离，并结合毛细管电泳法进行测定。该方法可以有效提取分离大豆苷元和槲皮素并对其进行含量测定，两种分析物分别在2-400mg/L和2-200mg/L范围内线性关系良好，仪器检出限为0.6mg/L，此法应用于市售中草药刺五加的测定，取得了较满意的结果，大豆苷元的加标回收率为93.01±3.92%；槲皮素的加标回收率为98.48±4.50%。 结论： 本研究通过单因素试验和响应曲面法，借助Design-Expert8.0软件优化了中草药刺五加成分的萃取分离条件和旋覆花、通经草、罗布麻成分的毛细管电泳分离条件，该方法方便、快速、成本低，有望用于上述几种中药质量分析。
旋覆花;槲皮苷;绿原酸;芦丁;含量测定
济南大学
硕士
药物分析学
吕元琦
2019
中文
R284.1
2020-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）