网络药理学探究神效瓜蒌散治疗乳腺癌作用机制
目的： 通过网络药理学探究神效瓜蒌散治疗乳腺癌的机制。 方法： 1、选取SKBR-3乳腺癌细胞，加入0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml和400μg/ml等不同剂量神效瓜蒌散水提物，使用台盼蓝法连续计数6天观察神效瓜蒌散水提物对SKBR-3乳腺癌细胞增殖的影响。 2、选取SKBR-3乳腺癌细胞，实验分组同上，培养72h，采用MTS实验的方法观察神效瓜蒌散水提物对乳腺癌细胞增殖的影响。 3、选取SKBR-3乳腺癌细胞，实验分组同上，通过划痕实验观察神效瓜蒌散对乳腺癌细胞迁移的影响。 4、网络药理学分析，从TCMSP数据库、TCMID数据库等数据库获得神效瓜蒌散的有效成分和相应靶点，通过网络数据库TTD和相关文献中获得乳腺癌的发病和治疗靶点，通过Cytoscape软件制作对应中药的成分-靶点网络图，预测神效瓜蒌散作用于乳腺癌的机制。 5、通过Westernblot检测经神效瓜蒌散处理过的乳腺癌SKBR-3细胞的ERα蛋白表达情况，以验证网络药理学预测的神效瓜蒌散作用于乳腺癌的机制。 结果： 1、台盼蓝法结果不同剂量神效瓜蒌散(0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml和400μg/ml)作用于乳腺癌SKBR-3细胞后，可以看见从50μg/ml的浓度细胞数目就开始减少，且在第3天细胞数目开始明显减少，并呈剂量、时间依赖性(P＜0.05)。 2、MTS实验结果不同剂量神效瓜蒌散(0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml和400μg/ml)作用于乳腺癌SKBR-3细胞72h后，发现随着神效瓜蒌散浓度的增加，OD值呈剂量依赖性下降(P＜0.05)。 3、划痕实验结果不同剂量神效瓜蒌散(0μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)作用于乳腺癌SKBR-3细胞24h后，发现随着神效瓜蒌散浓度的增加，各加药组细胞迁移的距离明显减少。 4、网络药理学神效瓜蒌散的瓜蒌、甘草、当归、乳香和没药5个成分，通过TCMSP数据库、TCMID数据库等数据库筛选到有效成分265个和相关靶点2305个，乳腺癌通过TTD数据库和相关文献筛选到靶点一共121个，通过Cytoscape软件构建的神效瓜蒌散成分靶点网络可以推测神效瓜蒌散通过ER、HSP90、PTGS2等靶点作用于乳腺癌发挥其抗肿瘤作用。 5、Westernblot实验通过Westernblot实验观察到加入不同浓度的神效瓜蒌散(0、100、200μg/mL)后，随着药物剂量的增加，ERα逐渐减少(P＜0.05)。 结论： 1、神效瓜蒌散能够在体外抑制乳腺癌细胞SKBR-3的增殖和迁移。 2、神效瓜蒌散可能主要通过抑制ER内分泌、炎症等通路治疗乳腺癌。
乳腺癌;神效瓜蒌散;网络药理学;临床治疗
天津医科大学
硕士
临床医学
吴雄志
2019
中文
R737.9;R730.52
2020-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）