Luzindole减轻LPS/D-Gal诱导的小鼠急性肝损伤
背景： 由感染，自身免疫因子，药物，毒素等因素引起的失控性的炎症反应是急性肝炎发展的主要病理机制之一。脂多糖（Lipopolysaccharide, LPS）是革兰氏阴性细菌的主要毒力因子，是代表性的致炎刺激物，它广泛参与包括急性肝损伤在内的多种炎症相关性疾病的发生发展。LPS (lipopolysaccharide, LPS)可在对D-半乳糖胺（D-galactosamine, D-Gal）致敏的小鼠中诱导严重的急性肝损伤(Acuteliver injury, ALI)，这一模型被广泛应用于实验研究。 炎症( inflammation)反应受激素、神经递质和代谢物等各种内源性调节因子的严格调控。褪黑素（Melatonin, MT）是主要从由松果腺释放的、在睡眠-觉醒周期的调节中发挥关键作用的激素。此外，大量的研究表明，褪黑素还可在外周组织中参与炎症反应的调控，在不同条件下，褪黑素可增强或抑制炎症反应、在炎症中发挥多样性的调节作用。 Luzindole（2-苄基-N-乙酰基色胺）是褪黑素受体的竞争性拮抗剂，在实验研究中已被广泛用于阻断内源性或外源性褪黑素的活性。尽管一些研究发现luzindole可以阻断褪黑素的抗炎作用，但在某些情况下，luzindole 也可以减轻组织的炎症性损伤，这与褪黑素的多样性作用相一致。本研究探讨了褪黑素受体拮抗剂luzindole对LPS/D-Gal诱导的急性肝炎小鼠中炎症反应，肝细胞凋亡、组织学异常和动物生存率的影响。 目的： 研究luzindole对脂多糖（LPS）/ D-Gal诱导的急性肝损伤的影响。 方法： 首先，本研究在 BALB/c 小鼠中复制 LPS/D-Gal 诱导的急性肝损伤模型，褪黑素受体阻断剂luzindole在LPS/D-Gal暴露前30 min经腹腔注入。在LPS/D-Gal注射后，分别在1.5h和6h处死小鼠，采集血浆和肝组织样本进行检测。 结果： luzindole 可减轻 LPS/D-Gal 诱导的急性肝损伤并且抑制肝细胞凋亡，结果如下： （1） Luzindole抑制LPS/D-Gal诱导的血浆中ALT、AST活性的升高。正常对照组与药物对照组无明显差异。与正常对照组比较，模型组的小鼠血清ALT、AST活性均明显升高，而luzindole处理之后小鼠血清ALT、AST活性均明显降低。 （2） Luzindole减轻肝组织形态的异常。正常对照组与药物对照组无明显差异。用LPS/D-Gal处理的小鼠的肝小叶结构模糊，肝细胞系无序，显示肝细胞坏死伴有炎性细胞浸润。Luzindole 干预组的肝脏充血和坏死等病理改变明显减轻。 （3） Luzindole提高小鼠的生存率。与LPS/D-Gal模型组相比， luzindole干预组显著提高了小鼠的生存率。 （4）Luzindole降低小鼠血清TNF-α和IL-6水平。用LPS /D-Gal 处理后，模型组 TNF-α 和 IL-6 水平显着高于正常对照组和luzindole对照组。在luzindole干预后，血清TNF-α和IL-6水平显着低于模型组。正常对照组和luzindole对照组之间血清TNF-α和IL-6水平无差异。 （5）Luzindole抑制LPS /D-Gal诱导的肝细胞凋亡。与正常对照组比较，模型组的TUNEL阳性凋亡小体显著增加；给予luzindole后小鼠中TUNEL阳性细胞的数量减少。 （6）Luzindole减少LPS/D-Gal诱导的cleaved caspase-3和cleaved PARP-1的上调。模型组的cleavedcaspase-3 and cleaved PARP-1表达水平较正常对照组明显升高，而经过luzindole处理后，可使增高的蛋白表达水平有所下调。 （7） Luzindole抑制LPS/D-Gal诱导的caspase活性。模型组与正常对照组相比较，小鼠肝组织caspase活性显著升高，而luzindole处理后可使小鼠肝组织caspase活性降低。 结论： luzindole处理可减轻LPS/D-gal诱导的急性肝损伤，提示luzindole可能对炎症性肝病的药物干预具有潜在价值。
luzindole;急性肝损伤;D-半乳糖胺;脂多糖;动物实验
重庆医科大学
硕士
基础医学
张力
2019
中文
R575
2019-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）