羊栖菜聚酮合酶的基因克隆、异源表达和底物特异性研究
褐藻多酚是羊栖菜中含量较高的一类具有生物活性的天然产物，从结构角度分析，尽管结构种类多样，但其仅由间苯三酚单体聚合而成。对长囊水云的研究表明，聚酮合酶基因是该单体生物合成途径中的关键基因。同源搜索结果发现，羊栖菜中存在一个聚酮合酶基因，与前者具有极高同源性；除此之外，羊栖菜中还存在着另外两个聚酮合酶基因，但目前对它们的功能还不甚了解。 本文从羊栖菜聚酮合酶的基因克隆、异源表达和酶学性质分析三方面进行探究：羊栖菜中存在 3 个聚酮合酶基因，分别是 SfPKS1、SfPKS2和SfPKS3，克隆这三个基因后在大肠杆菌中进行了异源表达，并对纯化后的重组蛋白进行了酶学性质的研究。 同源性分析羊栖菜的三个 PKS 基因表明：SfPKS2和SfPKS3 具有较高的相似度，且与宾得马尾藻SbPKS和水云EsiPKS1具有较高同源性；同时，SfPKS1、2和3的底物识别位点和催化活性位点的氨基酸序列高度保守。 SfPKS的催化底物测试了两种类型的CoA—直链烷基CoA和芳香类CoA，结果显示SfPKS能以芳香类CoA作为反应底物合成相应的产物。 对羊栖菜 PKS的研究有助于进一步挖掘羊栖菜中其他聚酮类化合物，为羊栖菜相关天然产物的深入研究和开发利用奠定基础。
羊栖菜;聚酮合酶;异源表达;基因克隆;底物特异性
温州大学
硕士
化学生物学
阎秀峰;邹慧熙
2018
中文
Q943.2
2019-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）