大蓟多糖分离与药物活性探究
大蓟（Cirsium japonicumDC）是一种菊科蓟属植物，它具有凝血止血、抗菌消炎、降血压，抗糖尿病和抗肿瘤等功效。大蓟的活性成分有很多种，包括黄酮和黄酮苷类、挥发油类、长链烯炔醇类、三萜和甾醇类、多糖和生物碱等。目前在大蓟的各种活性物质中研究最多的是大蓟黄酮，而对于大蓟多糖的研究却有待进一步展开。本文对大蓟多糖的提取分离、结构特征和药理活性进行了研究。采用热水浸提法得到含大蓟多糖的提取液，利用乙醚脱脂和除蛋白，经过透析和冷冻干燥后得到大蓟粗多糖干品。再用 DEAE-Cellulose 柱层析法纯化大蓟多糖。检测表明样品中糖含量为91.6%，主要由190.0 kDa、45.6kDa和3.9kDa三种分子量不同的组分组成，含10.4 %糖醛酸，蛋白含量为2.9 %。利用高碘酸氧化和Smith降解的方法对大蓟多糖的结构进行分析，结果显示大蓟多糖具有复杂的分支结构，存在大量不能被高碘酸氧化的糖苷键。红外光谱分析结果表明，大蓟多糖主要含-OH、-COOH、-C≡C-和吡喃环等官能团。体外DPPH自由基和羟自由基的清除实验和大蓟多糖对小鼠体内抗氧化指标（GSH、MDA、SOD 和 ALT）影响的检测结果显示，大蓟多糖有较强的自由基清除能力，并且显著降低肝脏中MDA的含量，表明大蓟多糖具有较好的抗氧化活性。同时还检测了大蓟多糖在体内和体外对小鼠免疫功能的影响(以免疫细胞活性，脾脏指数、胸腺指数和血液中补体的含量为指标)，结果显示大蓟多糖在体外能显著增强 NK 细胞的自然杀伤活性，增强脾脏淋巴细胞的增殖与转化能力和巨噬细胞的吞噬能力，在体内提高小鼠的脾脏指数以及血液中补体（C3）的含量，说明大蓟多糖具有免疫调节活性。此外本文利用报告基因法中探究了大蓟多糖在Hela细胞分别对不同信号通路的转录因子（Rb、p53和ISRE）活化的影响。结果表明大蓟多糖可以显著上调Rb和p53的活化，而抑制ISRE的活化，暗示大蓟多糖可能具有抗肿瘤和调节免疫的作用机理。本研究将有力地推动大蓟潜在的药物活性成分的挖掘以及活性研究，为大蓟的临床应用奠定实验理论基础。
大蓟;多糖;热水浸提法;药物活性
温州大学
硕士
化学生物学
廖志勇
2016
中文
R284;R285.5
2019-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）