蛹虫草抗氧化活性多糖制备技术研究
蛹虫草(Cordyceps militaris),又名北冬虫夏草,具有多种药理功效。蛹虫草多糖作为其重要的活性成分具有抗氧化特性。本研究以多糖对DPPH自由基的清除作用及其还原力为指标,对发酵培养基的最佳碳源、氮源、矿质元素进行筛选,确定产蛹虫草活性多糖的最优发酵培养基为:甘露糖 20g/L、蛋白胨15 g/L、酵母膏2 g/L、磷酸二氢钠5 g/L、硫酸镁1 g/L。获得的蛹虫草活性多糖在糖浓度为 1.2mg/mL 时对 DPPH 自由基的清除率可达 97.51%,在糖浓度为6mg/mL时,多糖的还原力可达1.764。 从蛹虫草胞外活性多糖(CMP)中初步分离纯化出CMP-1和CMP-2两个组分。测得CMP的蛋白质含量及糖醛酸含量分别为32.6% 和1.71%,而CMP-1和CMP-2几乎没有,这与紫外扫描和单糖组成分析结果一致。CMP与CMP-1、CMP-2的分子量分别为15705 Da、5998Da与7130 Da和8175 Da,表明为CMP-1和CMP-2新型低分子量蛹虫草多糖。蛹虫草粗多糖由Man、Rha、GlcA、GalA、Glc、Gal组成,CMP-1和CMP-2由Man、Rha、Glc、Gal组成。红外光谱图表明都具有多糖特征峰,多糖中均存在吡喃糖的单糖。另外CMP-1和CMP-2均有较高的生物活性,且酸性多糖CMP-2的抗氧化活性比中性多糖CMP-1的高。 不同的脱蛋白和干燥方式对蛹虫草多糖清除 DPPH·、OH-、ABTS+自由基及还原力的影响结果表明,未脱蛋白的CMP 、用sevag法脱蛋白的CMP-D-S 和用酶法脱蛋白的CMP-D-E的抗氧化活性没有明显的差别,然而干燥方式对蛹虫草多糖抗氧化活性有较大的影响。总的来说,经冷冻干燥处理的CMP-F比经热风干燥处理的CMP-H及喷雾干燥处理的CMP-S的抗氧化活性要高。蛹虫草多糖可作为天然的抗氧化剂,冷冻干燥可作为在食品行业中多糖及其他抗氧化剂产品的最佳干燥方式。 CMP-H、CMP-F和CMP-S的水分不超过10%,蛋白质含量分别为29.3%、31.4%、30.6%,糖醛酸含量不是很高,分子量都在13000Da和5000Da左右,单糖主要由Man和 Glc组成,单糖组成的分子摩尔比存在差异性,且多糖电镜扫描结果相差较大,不同的干燥方法对多糖的理化特征影响较大。本研究使蛹虫草多糖生产目标更加明确,可为抗氧化活性多糖的工业生产奠定基础,对我国蛹虫草相关产品的开发具有促进作用。
蛹虫草;活性多糖;制备技术;纯化工艺;干燥方式;抗氧化活性
温州大学
硕士
化学生物学
杨海龙
2016
中文
R284.2
2019-01-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)