电子顺磁共振图谱发现Dre2蛋白的[2Fe-2S]和[4Fe-4S]配基及其生命必需功能
酵母Dre2(人anamorsin/CIAPIN1的同源蛋白)是细胞质中Fe/S簇生物合成所必须的。Dre2与黄素蛋白Tah18形成复合物。Dre2的N末端区域的功能是不确定的，虽然它的 N末端区域与甲基转移酶具有同源性，但是它并不具甲基转移酶活性，不能结合甲硫氨酸的含S腺苷。然而在Dre2的C末端区域，包含8个在进化上保守的半胱氨酸。在先前的研究中通过大肠杆菌表达酵母中的 Dre2，并且通过EPR的方法证明Dre2包含一个[2Fe-2S]和一个[4Fe-4S]。在此次的研究中，本文将8个保守的半胱氨酸分别突变为丙氨酸。通过研究发现Dre2突变体C252A、C263A、C266A和C268A缺乏[2Fe?2S]的EPR信号，而C314A、C322A和C325A缺乏[4Fe?4S]的EPR信号。本文的数据清晰的证明了Cys252、Cys263、Cys266和Cys268是[2Fe-2S]的配基，而Cys311、Cys314、Cys322和Cys325是[4Fe-4S]的配基。此外，通过 C263A和 C322A的 EPR数据分析，本文获得了[4Fe-4S]EPR的g因子值为gx,y,z=1.830，1.947和2.0181，而[2Fe-2S]EPR的g因子值为gx,y,z=1.919，1.962和2.001。同时，通过两个Fe/S簇之间电子自旋-自旋之间的相互作用，证明了两个 Fe/S簇是非常相近的。此外，通过使用酵母中的shuffle strain，本文第一次证实了两个Fe/S簇对于细胞的生长具有十分重要的作用。
Dre2蛋白;Fe/S簇;生物合成;电子顺磁共振图谱;[4Fe-4S]配基;[2Fe-2S]配基
天津大学
硕士
药学
张雁
2017
中文
Q555
71
2018-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）