lncRNA-2271对BMSCs成骨分化的影响及其机制探讨
目的： 研究lncR-2271对骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化能力的影响，并探讨lncR-2271调控BMSCs成骨分化的作用机制。 方法： 从骨髓健康志愿者骨髓中分离培养BMSCs，分为三组。分别使BMSCs过表达和低表达 lncR-2271，并设置阴性对照组，每组均加入成骨诱导剂进行培养。转染48h后，通过实时定量PCR检测三组细胞中lncR-2271的表达，7d、14d后采用酶标法检测成骨细胞碱性磷酸酶（ALP）的活性，采用ELISA法检测骨形态发生蛋白（BMP2）的含量，采用Western blot法检测Smad1/5/8、Runx2的表达；21d后行茜素红染色，用Image J图片处理软件计算矿化结节面积比。分析lncR-2271调控BMSCs成骨分化的作用机制。 结果： 与对照组相比，转染48h后过表达组lncR-2271的表达量显著高于对照组（P<0.01），低表达组lncR-2271的含量显著低于阴性对照组（P<0.01）；干预7d、14d后，过表达组BMP2、Smad1/5/8和Runx2的含量显著高于阴性对照组和低表达组（P<0.01），低表达组BMP2、Smad1/5/8和Runx2的含量显著低于阴性对照组（P<0.01）；培养7d、14d后，过表达组ALP的活性值显著高于对照组和低表达组（P<0.01），低表达组ALP的活性值显著低于阴性对照组（P<0.01）；干预21d后，茜素红染色显示低表达组为弱阳性，对照组为阳性，而过表达组呈强阳性，过表达组钙沉积量显著高于对照组和低表达组（P<0.01），低表达组钙沉积量显著低于对照组（P<0.01）。 结论： 1.lncR-2271能够在体外上调BMSCs中BMP2、Smad1/5/8和Runx2蛋白的表达，最终促进BMSCs的成骨分化，对骨再生和骨形成具有重要意义。 2.lncR-2271可能通过BMP2-Smad1/5/8信号通路促进BMS Cs的成骨分化。
长链非编码RNA;骨髓间充质干细胞;成骨分化;分子机制
广西中医药大学
硕士
外科学
李宏宇
2017
中文
R68
84
2019-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）