牛磺酸镁抗Ⅰ型长QT综合征和尖端扭转型室速的作用研究
目的： 观察牛磺酸镁（taurine–magnesium coordination compound，TMCC）抗Ⅰ型长QT综合征（Type1 Long QT syndrome，LQT1）和尖端扭转型室速（Torsade de pointes，TdP）的作用以及抗豚鼠心室肌细胞复极延长的作用。 方法： 1.采用Langendorff逆行主动脉灌流法对豚鼠离体心脏进行灌流，利用Biopac生理记录仪采集并记录豚鼠离体心脏表面Ⅱ导联心电图。首先观察TMCC对正常豚鼠离体心脏心率（Heart Rate，HR）、QT/QTc间期、跨室壁复极离散度（transmural dispersion of repolarization，TDR）等的影响。随后使用IKs通道阻滞剂Chromanol293B建立LQT1药理学模型，观察并研究TMCC对LQT1的对抗作用。 2.采用Langendorff逆行主动脉灌流法对豚鼠离体心脏进行灌流，利用Biopac生理记录仪采集并记录豚鼠离体心脏表面Ⅱ导联心电图。随后使用IKs通道阻滞剂Chromanol293B合并低钾建立TdP模型，观察并研究TMCC对该TdP模型的对抗作用。 3.采用Langendorff逆行主动脉灌流酶解法消化并急性分离豚鼠单个心室肌细胞，应用全细胞膜片钳技术，采用电流钳模式记录动作电位。首先观察不同浓度TMCC对豚鼠心室肌细胞动作电位时程（action potential duration，APD）的影响，随后又观察了不同浓度TMCC抗IKs通道阻滞剂Chromanol293B诱发豚鼠心室肌细胞动作电位复极延长的作用。 结果： 1. TMCC对正常豚鼠离体心脏的作用。结果显示，与离体心脏正常灌流时相比，1、2、4 mM TMCC可减慢心率，分别由225.72±17.41、212.78±22.01、218.16±10.93 beats/min降至213.51±17.69、187.20±18.25、181.52±12.27 beats/min（n=6，P<0.01）；延长QT间期，分别由174.37±4.63、178.30±6.77、174.97±4.27 ms延长至182.30±6.09、200.67±7.59、197.30±4.37 ms（n=6，P<0.01）；2、4 mM TMCC延长QTc，分别从196.23±5.90 ms延长至205.01±7.23 ms（n=6，P<0.05）、196.06±3.94 ms延长至199.04±4.02 ms（n=6， P<0.01）；1 mM TMCC对QTc未见显著性影响；1、2、4 mM TMCC对TDR无显著性影响；1、2、4 mM TMCC延长PR间期，分别从65.50±0.81、60.25±2.75、58.33±3.45 ms延长至77.67±2.12、75.75±2.56、71.83±3.34 ms（n=6，P<0.01）；1、2、4 mM TMCC增大有效不应期（Effective Refractory Period， ERP），分别从123.33±6.12、121.93±6.94、123.64±4.49 ms增加至131.93±6.26 ms（n=6，P<0.01）、139.83±5.98 ms（n=6， P<0.05）、143.04±7.26 ms（n=6，P<0.01）。 2. TMCC对抗LQT1的作用。结果显示，与离体心脏正常灌流时相比，10μM Chromanol293B可延长QTc间期，分别从191.58±3.51、193.12±3.82 ms延长至203.07±4.44 ms（n=6，P<0.01）、202.96±4.35 ms（n=6，P<0.05）；增大TDR，分别从54.17±3.30、56.20±3.75 ms增加至68.60±6.57 ms（n=6，P<0.05）、72.33±5.32 ms（n=6，P<0.01）。2、4 mM TMCC可使延长的QTc间期分别缩短至195.87±4.45、196.75±4.71 ms（n=6，P<0.05 vs LQT1模型组），但对增大的TDR无显著性作用。 3. TMCC可对抗TdP。结果显示，在10μM Chromanol293B合并低钾（1.8 mM）条件下，TdP发生率为6/7。1、2、4 mM TMCC可降低TdP发生率，分别为5/6、1/6、0/6。 4. TMCC可加速豚鼠心室肌细胞复极。结果显示，与正常对照组相比，0.01、0.1、1 mM TMCC可缩短 APD，使 APD90（action potential duration at90%repolarization）由437.30±36.29 ms分别缩短至268.55±32.42、199.19±24.31、313.23±31.80 ms（n=10，P<0.01）；使APD50（action potential duration at50%repolarization）由392.94±36.75 ms分别缩短至237.31±32.85 ms（n=10，P<0.01）、173.26±26.37 ms（n=10，P<0.01）、282.81±32.03 ms（n=10，P<0.05）。 5. TMCC具有抗IKs通道抑制剂引起动作电位复极延长的作用。单个豚鼠心室肌细胞动作电位测定结果显示，正常对照组细胞在急性灌流10μM Chromanol293B后，动作电位复极时程增加，APD90从475.31±26.29 ms增加至525.33±28.38 ms（n=6，P<0.01），延长约12.58%；APD50从441.72±27.50 ms增加至492.03±28.83 ms（n=6，P<0.01），延长约13.78%。而预先孵育0.01、0.1、1μM TMCC组在急性灌流10μM Chromanol293B后，动作电位时程延长程度较正常对照组有所减弱， APD90分别从357.41±26.97、275.25±39.88、349.56±65.05 ms增加至374.17±26.86 ms（n=6，P<0.01）、281.57±40.24 ms（n=6，P>0.05）、359.88±68.18 ms（n=6，P>0.05），分别延长约4.87%（n=6，P<0.05 vs正常对照组），2.56%（n=6，P<0.01 vs正常对照组），6.11%（n=6，P<0.05 vs正常对照组）；APD50分别从328.78±24.75、246.93±36.77、322.91±62.78 ms增加至346.65±24.94 ms（n=6，P<0.05）、252.73±38.47 ms（n=6，P>0.05）、343.56±66.41 ms（n=6， P>0.05），分别延长约5.61%（n=6，P<0.05 vs正常对照组）、1.94%（n=6， P<0.01 vs正常对照组）、6.71%（n=6，P<0.05 vs正常对照组）。 结论： 1. TMCC能够缩短由Chromanol293B导致的离体心脏QTc间期延长，揭示其具有一定的抗LQT1作用。 2. TMCC可降低由单纯Chromanol293B合并低钾所致的RR、QT不稳定性增加以及跨室壁复极离散度增大，降低Chromanol293B合并低钾所致的尖端扭转型室速发生率。 3. TMCC缩短豚鼠心室肌细胞动作电位复极时程，能对抗由Chromanol293B所致的动作电位复极时程延长。
牛磺酸镁;Ⅰ型长QT综合征;尖端扭转型室速;心肌细胞;复极
天津医科大学
硕士
药学
娄建石
2017
中文
R972
91
2019-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）