乙肝疫苗记忆性免疫应答过程中cTfh及其亚群的表达研究
目的： 1.检测cTfh及其亚群在乙肝疫苗记忆性免疫应答中表达水平。 2.验证cTfh是否参与乙肝疫苗记忆性免疫应答。 3.界定乙肝疫苗记忆性免疫应答中主要辅助作用的cTfh亚群。 4.探索乙肝疫苗记忆性免疫应答中影响乙肝表面抗体水平的重要因素。 方法： 通过招募健康成年人，选取符合纳入符合标准的研究对象；给予研究对象接种乙肝疫苗，在乙肝疫苗接种后不同时刻，经酶联免疫吸附法检测HBsAb浓度；通过流式细胞术在外周血单核细胞上检测 cTfh及其亚群；经免疫磁珠法富集CD4+T细胞，进一步提取RNA经荧光定量PCR检测相对表达量。 结果： 1.本次研究共选入28个研究对象，其中女性20人，男性8人，年龄中位数为25岁，所有研究对象均接种过乙肝疫苗。 2.健康成人经强化一剂次乙肝疫苗免疫后，其HBsAb浓度中位数在接种前和接种后第7、14、28天分别是24.76、77.98、166.99、202.69,各时间点间乙肝表面抗体水平的差异存在显著性（?2=82.84，P<0.001）。 3. cTfh细胞占CD4+T细胞比例中位数在接种前和接种后第7、14、28天分别是8.34%、13.35%、14.60%、11.35%，不同时间点间cTfh细胞占CD4+T细胞比例差异存在显著性（?2=21.99，P<0.001）。 4. ICOS与PD1是cTfh功能状态标志物，ICOS+Tfh细胞占cTfh细胞比例中位数在乙肝疫苗接种前和接种后第7、14、28天分别是3.39%、4.05%、3.70%、2.61%，不同时间点其占 CXCR5+CD4+T细胞百分数差异存在显著性（?2=8.2， P=0.04）；PD1+Tfh细胞占cTfh细胞比例平均数在不同时点分别是11.40%、12.60%、16.10%、9.37%，不同时间点其占 cTfh细胞百分数的中位数差异不存在显著性（?2=4.275，P=0.233）。 5.通过CXCR3与CCR6可将cTfh分为不同亚群，CXCR3+Tfh细胞占Tfh 细胞比例中位数在乙肝疫苗接种前和接种后第7、14、28天分别是56.55%、54.15%、53.05%、53.85%，不同时间点其占 cTfh细胞百分数差异存在显著性（?2=9.07， P=0.02）；CCR6+Tfh细胞占Tfh细胞比例平均数在乙肝疫苗接种前和接种后第7、14、28天分别39.52%、47.31%、47.54%、42.77%，不同时间点其占 cTfh细胞百分数的平均数存在差异存在显著性（F=13.81,P<0.001）。 6.观察Tfh相关基因在乙肝疫苗接种前与接种后第7、14、28天四次检测时间点表达情况，在不同时间点间存在差异的mRNA有T-bet、Bcl6、IL21。 7.通过相关分析发现，乙肝抗体水平与Bcl6、IL21 mRNA表达水平存在相关性，相关系数为0.695、0.709；乙肝抗体水平改变值与细胞比例改变值存在相关性的有CCR6+Tfh，其相关系数为0.647. 结论： 1. cTfh细胞参与了乙肝疫苗记忆性免疫过程 2.在乙肝记忆性免疫过程中发生作用的亚群可能是CXCR-Tfh和CCR6+Tfh。 3.在记忆性免疫过程中影响乙肝表面抗体水平的因素有 IL21、Bcl6、CCR6+Tfh。
乙肝疫苗;记忆性免疫应答;辅助作用;cTfh亚群
广东医科大学
硕士
临床流行病学
倪进东
2017
中文
R392.7;R512.62
58
2018-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）