JS-K促进白血病细胞系HL-60和K562凋亡机制的研究
【目的】 1.观察不同浓度JS-K对白血病细胞HL-60和K562增殖抑制作用。 2.研究JS-K对凋亡相关基因和蛋白(P53，Bcl-2，Bax)表达的影响。 3.初步探讨JS-K诱导白血病细胞HL-60和K562凋亡的具体机制。 【方法】 1. CCK8检测不同浓度JS-K处理后HL-60和K562细胞的增殖活性。 2.流式细胞术检测不同浓度JS-K处理后HL-60和K562细胞的凋亡情况。 3. siRNA转染沉默HL-60和K562细胞中P53 mRNA的表达。 4. Western blot检测不同浓度JS-K处理后凋亡相关蛋白的表达。 5.实时荧光定量PCR检测不同浓度JS-K处理后凋亡基因的表达。 【结果】 1. JS-K对白血病细胞增殖的影响：不同浓度(0，0.63，1.25，2.5，5，10和20μM)的JS-K处理HL-60和K562细胞12 h,24 h和48 h后，细胞的增殖受到抑制，，且抑制率具有浓度和时间依赖性。 2. JS-K对白血病细胞凋亡的影响：分别应用(0，1.25，2.5和5μM)的JS-K处理细胞24 h，HL-60和 K562细胞发生凋亡，且随浓度增加凋亡越明显。 3. JS-K对凋亡相关P53、Bcl-2、Bax的蛋白和基因表达的影响：分别应用(0，1.25，2.5和5μM)的JS-K处理24 h，白血病细胞HL-60和K562的P53、Bax蛋白和基因表达随浓度增加而被上调，而Bcl-2蛋白和基因的表达随浓度增加而被下调。 4. siRNA沉默P53的表达后，对Bcl-2、Bax的蛋白和基因表达的影响：分别通过siRNA转染和加入浓度为2.5μM的JS-K作用HL-60和K562细胞24 h，按照处理方式不同，细胞分为：空白对照组、JS-K药物处理组、siRNA转染组及JS-K和siRNA共同处理组。结果显示：沉默P53的表达，将上调Bcl-2蛋白基因的表达，同时下调Bax蛋白基因的表达。 【结论】 1. JS-K能够不同程度的抑制白血病细胞HL-60和K562的增殖，且存在时间及药物剂量依赖特性。 2. JS-K能够诱导白血病细胞HL-60和K562的细胞凋亡。 3. JS-K是通过上调P53，进而下调抗凋亡蛋白Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bax的表达，从而导致细胞凋亡。
JS-K药物;细胞凋亡;白血病;HL-60细胞;K562细胞;抑制作用
广东医科大学
硕士
儿科学
陈日玲
2017
中文
R733.7
55
2018-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）