利用模式动物斑马鱼研究水温对脊髓损伤修复的影响
【目的】 通过手术建立斑马鱼脊髓损伤模型；探讨在改变斑马鱼生活的水环境温度后，脊髓损伤后其游动情况，并检测在脊髓损伤修复过程中，损伤处细胞数目以及脑内胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor, gdnf）及一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, nos）基因的表达情况。 【方法】 首先利用手术构建斑马鱼脊髓损伤模型；通过改变斑马鱼生活的水环境温度（28℃、30℃、32℃），观察其脊髓损伤后游动能力的变化情况；然后分离损伤处脊髓，用振动切片技术将脊髓水平切片，再用免疫组织化学技术进行染色，并观察损伤处不同时间点（1 d、7 d、14 d）细胞数目的改变情况；最后用实时荧光定量PCR法分析脑内相关基因（gdnf、nos）在脊髓损伤后的变化情况。 【结果】 1.通过手术完全切断斑马鱼脊髓后，斑马鱼失去游动能力，但随时间其游动能力逐渐恢复； 2.斑马鱼脊髓损伤后，水温对其游动能力的影响：28℃、30℃、32℃水温均不会导致未手术组与假手术组斑马鱼游动能力的改变（P>0.05）；32℃水温环境能够使脊髓损伤组斑马鱼比28℃、30℃水温环境的斑马鱼恢复游动的能力明显增强（P<0.05）。 3.斑马鱼脊髓切片染色实验结果显示，脊髓损伤后损伤处细胞数目明显增多（P<0.05）。相同时间点，水温32℃比28℃、30℃细胞数目增多更加明显（P<0.05）。 4.实时荧光定量实验结果显示，gdnf基因在脊髓损伤术后与对照组相比在1 d、7 d、14 d均明显升高（P<0.05）；nos基因在脊髓损伤术后1 d明显升高（P<0.05），7 d时与相同时间点假手术组相比无明显差异（P>0.05），而14 d时与相同时间点假手术组相比明显降低（P<0.05）。 【结论】 适当提高水环境温度可促进斑马鱼脊髓损伤后恢复。
脊髓损伤;术后修复;动物模型;临床疗效
广东医科大学
硕士
神经病学
张晶晶
2017
中文
R651.2
55
2018-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）