虫草素对不同类型人乳腺癌细胞作用机制的研究
【目的】 本研究主要揭示虫草素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭的抑制和促进凋亡的作用以及其分子机制。重点关注HOXD10、ERK和p38 MAPK信号通路在其中所发挥的调控作用，并进一步研究虫草素抑的作用靶点。 【方法】 1.为了阐明虫草素对乳腺癌细胞的作用，我们使用两种细胞株MDA-MB-231和MCF-7进行研究。虫草素处理MDA-MB-231和MCF-7细胞后，通过CCK8、流式细胞术和Transwell等方法检测乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的变化。 2.为了阐明HOXD10基因在虫草素抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭，促进凋亡过程中所起的作用，我们通过siRNA下调HOXD10基因的内源性表达，然后加入虫草素处理MDA-MB-231和MCF-7细胞，通过CCK8、流式细胞术和Transwell等方法检测乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的变化。 3.为探讨p38 MAPK和ERK信号通路在虫草素抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭和促进凋亡过程中所起的作用，我们通过抑制剂SB203580和PD98059抑制p38 MAPK和ERK信号通路，然后加入虫草素处理MDA-MB-231和MCF-7细胞，通过CCK8、流式细胞术和Transwell等方法检测乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的变化。 【结果】 1．（1）虫草素干预MCF-7和MDA-MB-231细胞后，在24、48、72小时检测的OD值显著低于对照组细胞的OD值，乳腺癌细胞的增殖明显受到抑制，差异具有统计学意义（p<0.05）。（2）虫草素干预后，MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡率显著高于对照组细胞的凋亡率，差异具有统计学意义（p<0.05）。（3）虫草素干预后，MCF-7和MDA-MB-231细胞迁移能力显著低于对照组细胞的凋亡率，差异具有统计学意义（p<0.05）。（4）虫草素干预后，MCF-7和MDA-MB-231细胞侵袭能力显著低于对照组，差异具有统计学意义（p<0.05）。 2．（1）siRNA转染MCF-7和MDA-MB-231细胞后，用虫草素处理24、48、72小时，检测的OD值显著低于对照组（NC组）细胞的OD值，乳腺癌细胞的增殖受到抑制，差异具有统计学意义(p<0.05）。（2） siRNA转染MCF-7和MDA-MB-231细胞后，再用虫草素处理，处理组凋亡率显著高于对照组，差异具有统计学意义（p<0.05）。（3）siRNA转染MCF-7和MDA-MB-231细胞后，再用虫草素处理，其迁移能力显著低于对照组，差异具有统计学意义（p<0.05）。（4） siRNA转染MCF-7和MDA-MB-231细胞后，其侵袭能力显著低于对照组，差异具有统计学意义（p<0.05）。 3.（1）SB203580预处理MCF-7和MDA-MB-231细胞1h后，在24、48、72小时检测的OD值与对照组细胞的OD值无显著性差异（p>0.05）。（2）SB203580干预后MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡率和对照组细胞的凋亡率无显著性差异（p>0.05）。（3）SB203580干预后MCF-7和MDA-MB-231细胞迁移能力与对照组细胞迁移能力无显著性差异(p>0.05）。（4） SB203580干预后MCF-7和MDA-MB-231细胞侵袭能力与对照组相比，差异无统计学意义（p>0.05）。 4.（1）PD98059预处理MCF-7和MDA-MB-231细胞1h后，在24、48、72小时检测的OD值与对照组细胞的OD值无显著性差异（p>0.05）。（2）PD98059干预后MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡率和对照组（DMSO组）细胞的凋亡率无显著性差异（p>0.05）。（3）PD98059干预后MCF-7和MDA-MB-231细胞迁移能力与对照组细胞迁移能力无显著性差异(p>0.05）。（4） PD98059干预后MCF-7和MDA-MB-231细胞侵袭能力与对照组相比，差异具无统计学意义。（p>0.05）。 【结论】 1.虫草素能抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7的增殖、迁移和侵袭并诱导其凋亡。 2.下调HOXD10的表达可促进虫草素对乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用。 3.抑制p38MAPK和ERK信号通路不会影响虫草素对乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用。
虫草素;乳腺癌;MAPK/ERK信号通路;MCF-7细胞;细胞增殖
广东医科大学
硕士
外科学(乳腺外科)
李建文
2017
中文
R737.9
60
2018-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）