RhoA抑制低氧诱导成骨细胞凋亡的研究
【目的】 检测低氧诱导小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞凋亡的情况。探讨RhoA基因对低氧诱导小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞凋亡的调控作用。为成骨细胞缺血缺氧性损伤提供有价值的干预治疗方法。 【方法】 分别在常氧（21% O2）和低氧（1% O2）条件下培养MC3T3-E1细胞，培养0,12,24和48小时后，运用流式细胞技术、caspase3酶活性检测法，检测细胞凋亡情况。运用Western Blot实验，对细胞凋亡相关标志物：细胞色素c、caspase3和裂解的PARP等进行检测分析。通过使RhoA基因过表达或降低RhoA基因表达的方法，调控MC3T3-E1细胞中RhoA蛋白的表达量，在低氧条件下培养24和48小时后，运用流式细胞技术和caspase3酶活性检测法，对细胞凋亡情况进行分析。 【结果】 在成骨细胞MC3T3-E1中，低氧处理可以明显促进MC3T3-E1细胞凋亡。检测结果显示，低氧处理后的MC3T3-E1细胞，凋亡细胞比例、caspase3酶活性和细胞凋亡相关标志物：细胞色素c、caspase3和裂解的PARP都有着更高的水平；通过调控MC3T3-E1细胞中RhoA蛋白的表达，结果显示，用慢病毒转染 RhoA过表达质粒后可以显著地抑制细胞凋亡,而通过转染沉默 RNA抑制RhoA表达后，细胞凋亡显著加剧。 【结论】 本研究证实了 RhoA在低氧诱导成骨细胞的细胞凋亡中的保护作用，这意味着，促进 RhoA的表达，可能是对成骨细胞缺氧缺血性损伤有价值的治疗性干预的方法。
RhoA蛋白;低氧诱导;细胞凋亡;成骨细胞缺氧缺血性损伤;干预治疗
广东医科大学
硕士
骨外科学
陈扬
2017
中文
R681
49
2018-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）