基于OATP1B1基因多态性研究丹参相关组分对氟伐他汀转运的影响及其机制
背景： 氟伐他汀（Fluvastatin，FV）是临床上广泛使用的调血脂药物，经有机阴离子转运多肽1B1（organic anion transport polypeptide1B1，OATP1B1）转运入肝后发挥作用。OATP1B1基因多态性直接影响他汀类药物的药代动力学过程，那么该基因多态性是否影响FV的转运，进而改变其降血脂疗效，确实值得探索。目前，我国临床常以他汀类药物联合丹参制剂治疗高脂血症，并取得了很好的疗效，虽然两药合用的药效学机制已有报道，但其涉及的药物相互作用及其药代动力学机制尚不清楚。因此有必要基于OATP1B1基因多态性研究FV转运差异及合用丹参中相关组分对FV转运的影响与作用机制，为FV的个体化用药治疗及合用丹参制剂的临床应用提供理论基础与实验依据。 目的： 基于OATP1B1基因多态性研究氟伐他汀转运差异及丹参中相关组分对FV转运的影响，探明其可能的提高降脂疗效和降低药物不良反应的作用机制，为临床个体化治疗提供科学依据。 方法： 1.考察摄取时间、药物浓度对FV在OATP1B1*1a、OATP1B1*5与OATP1B1*15细胞中摄取转运的影响，确定 FV最佳摄取时间和底物浓度，比较三种基因型OATP1B1细胞中FV动力学参数（Km、Vmax和CLint值），分析OATP1B1*5和*15突变对FV转运的影响。 2.系列浓度的丹参中相关组分诱导不同基因型 OATP1B1-HEK293T细胞48h后，分别考察 FV摄取量的变化，筛选3种可显著影响FV在不同基因型OATP1B1-HEK293T细胞中摄取的丹参组分。 3.设置阳性对照10μM利福平，系列浓度熊果酸、隐丹参酮和二氢丹参酮I诱导野生型OATP1B1-HEK293T细胞48h，使用RT-qPCR、Western-blotting等技术手段检测SLCO1B1 mRNA及OATP1B1蛋白表达水平，分析此3种组分影响FV转运的作用机制。 结果： 1.FV在OATP1B1*1a、*5及*15-HEK293T细胞模型中其动力学参数Km(μM)与Vmax(pmol/mg protein·min-1)分别为17.59±2.33，8.57±0.42；12.52±1.43（P<0.5），4.42±0.21（P<0.5）及18.49±2.06，9.13±0.61；其CLint分别为0.49，0.36（P<0.5）及0.50。 2.系列浓度利福平、熊果酸、隐丹参酮和二氢丹参酮诱导不同基因型OATP1B1-HEK293T细胞48h后，其对不同基因型OATP1B1-HEK293T细胞中FV的摄取均有不同程度的促进作用，且氟伐他汀的摄取速率随着药物浓度的升高呈递增趋势。丹参酮I高浓度时可抑制不同基因型OATP1B1-HEK293T细胞中FV的摄取。丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参酮IIA对不同基因型OATP1B1-HEK293T细胞中FV的转运无明显作用。 3.系列浓度熊果酸、隐丹参酮和二氢丹参酮I作用于野生型OATP1B1细胞48h后均可诱导SLCO1B1 mRNA和OATP1B1蛋白的表达，并随着药物浓度的升高而增强。熊果酸的诱导作用最强，隐丹参酮次之，二氢丹参酮I诱导作用弱于10μM利福平。 结论： 1.与OATP1B1*1a-HEK293T（野生型）相比，OATP1B1*5-HEK293T对FV的转运活性略低，OATP1B1*15-HEK293T对FV的转运活性无明显差异。 2.熊果酸、隐丹参酮和二氢丹参酮I对不同基因型OATP1B1-HEK293T细胞中FV的摄取均有不同程度的促进作用，丹参酮I高浓度时对不同基因型OATP1B1-HEK293T细胞中FV的摄取有不同程度的抑制作用。其他组分对不同基因型OATP1B1-HEK293T细胞中FV转运无明显作用。 3.熊果酸、隐丹参酮和二氢丹参酮I可上调SLCO1B1 mRNA和OATP1B1蛋白，提高其转运功能，进而增加氟伐他汀的摄取，降低其血药浓度，提高降脂疗效。
氟伐他汀;转运功能;丹参相关成分;有机阴离子转运多肽1B1;药代动力学
南昌大学;南昌大学医学院
硕士
药学
熊玉卿
2017
中文
R972.6
77
2018-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）