靶向肿瘤相关重要蛋白BRD4和RHOA小分子抑制剂的发现及作用机制的研究
近年来，随着生物医药领域的迅猛快速发展，靶向特定蛋白筛选其特异性的小分子抑制剂已成为该领域的重点。本文中着眼于表观遗传相关蛋白及细胞骨架类蛋白这两个不同的领域中的重要蛋白进行小分子抑制剂的筛选。 组蛋白乙酰化作为表观遗传学中重要的一类翻译后修饰，在调控基因转录与染色体构成等多个领域中发挥着重要的作用，并且与癌症的发生发展密切相关，因此，组蛋白乙酰化已成为国内外的研究热点。BRD4蛋白作为组蛋白乙酰化识别因子”reader”，是属于BET家族的一员，它能够特异性结合乙酰化修饰的赖氨酸，并招募其他转录因子调控BCL2，CDK6，c-Myc等下游致癌基因。目前研究表明，BRD4的异常表达与MLL，AML等白血病以及睾丸中腺癌等众多疾病相关，因此靶向BRD4蛋白筛选小分子抑制剂是十分有必要的，在本文中，我们利用BRD4蛋白可以识别乙酰化的赖氨酸这一原理，结合AlphaScreen技术灵敏均相无放射性等优点，我们建立了BRD4的“HITs”筛选平台，初步筛选得到了一类骨架新颖，活性较好的小分子抑制剂，该小分子在体外可以在0.81土0.03 uM左右显著抑制BRD4蛋白识别乙酰化的组蛋白，不仅如此该化合物在细胞水平还可以抑制血液病细胞的增殖等，因此其是一个潜在的成药的小分子。 RhoA作为GTP酶的一种，是重要的细胞信号通路转导因子，并影响细胞骨架的形态等，属于小G蛋白家族的一员。RhoA与上游的三种蛋白相互作用，并受这三种蛋白的调控，从而在RhoA-GTP活性状态及RhoA-GDP非活性状态之间相互转换。目前研究表明，RhoA的高表达与多种肿瘤的发生发展密切相关，例如乳腺癌，前列腺癌，睾丸癌，肺癌等。因此，RhoA作为重要的抗癌靶点，寻找针对RhoA的小分子抑制剂是必不可少的。而现有RhoA的小分子抑制剂存在活性差选择性差等重要的问题，因此我们基于蛋白热迁移实验建立了靶向RhoA的高通量筛选平台，筛选得到了抑制RhoA酶活性及与GEF相互作用的共价先导化合物，并以此化合物为分子探针，解释了RhoA蛋白变构调控的新机制。
表观遗传相关蛋白;细胞骨架类蛋白;小分子抑制剂;转导因子;抗癌靶点
南昌大学;南昌大学医学院
硕士
药学
罗成
2017
中文
R730.5;R979.1
77
2018-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）