间充质干细胞治疗单板U型场地运动员肌腱损伤动物模型的建立研究
伤病问题一直是影响单板U型运动员运动成绩和职业生涯的主要问题，其中肌腱损伤是体育竞技中较为普遍的运动性疾病，导致运动员竞技水平和运动能力不能正常发挥，已成为运动医学领域的急需解决的问题之一。干细胞可以向多胚层分化，在损伤组织修复中也起到了显著的作用。本研究体外培养脐带间充质干细胞（Umbilical cord Mesenchymal Stem Cells,UCMSCs）和牙龈间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells, GMSCs），传代培养到一定体系，检测UCMSCs和GMSCs的生物学特性，比较UCMSCs和GMSCs生物学特性之间的差异，选择更为优质的细胞为肌腱治疗提供研究基础。建立动物损伤模型，深入探究干细胞在肌腱修复过程中所起到的治疗作用，获得以下实验结果： 1.使用Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶混合消化羊脐带组织，分离纯化后得到接种在六孔板中，体外培养至31代。用RT-PCR和免疫荧光检测脐带组织来源的干细胞表面标记物表达情况。免疫荧光检测结果，细胞阳性表达的基因为：CD44、CD73、CD90；RT-PCR结果显示：CD29、CD44、CD90表达，不表达的基因为CD34。研究获得细胞的生物学特性，以及诱导细胞向成脂、成骨、成软骨、成肌腱细胞分化。RT-PCR检测其特异性基因均为阳性。 2.选择Ⅰ型胶原酶和胰酶混合消化牛牙龈组织，分离出较为纯净的目的细胞，体外培养至20代。分别检测RT-PCR和免疫荧光特异性标记物的表达情况：CD29、CD44、CD105均呈阳性表达。对其生物学特性和多向分化潜能进行研究。 3.建立小鼠肌腱损伤模型，用Ⅰ型胶原酶局部注射法损伤小鼠肌腱，采用石蜡病理切片观察肌腱组织的损伤情况，检测小鼠血液中肌酸激酶（CK）含量的变化。将UCMSCs进行荧光标记接种到小鼠损伤部位，冰冻切片检测细胞能向损伤部位集中。进行组织切片和血清学分析肌腱结构和功能得到良好的修复。 本研究将围绕以上几点着重介绍间充质干细胞的生物学特性及在肌腱损伤修复过程中所起的重要作用。为干细胞治疗奠定理论基础，为后续临床应用提供实验依据。
脐带间充质干细胞;分离培养;多分化潜能;动物模型;肌腱损伤;修复治疗
哈尔滨体育学院
硕士
运动人体科学
赵玉华;关伟军
2017
中文
R873.04
73
2018-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）