猪脾脏抗菌肽SSH19的分离鉴定及其生物信息学分析
抗菌肽(Antimicrobial peptides，AMPs)在许多生物体中自然存在，是针对外来微生物（例如真菌，细菌，病毒等）入侵的天然防御系统的主要活性成分之一。抗菌肽表现出广谱抗菌活性，其抗菌机制独特而复杂，不易导致耐药性产生。本研究从猪脾脏中分离纯化出新型抗菌肽，多肽合成后对其进行抗菌活性检测，从而筛选出活性较强的抗菌肽，而后通过一系列生物信息学相关软件对其理化性质、二级结构、跨膜区、信号肽、细胞内定位、修饰位点等方面特性进行分析，为将其开发成新型抗菌药物奠定基础。 本研究通过无菌操作方法获得猪脾脏，运用组织匀浆、超声破碎、乙酸浸提和高速离心方法获得脾脏粗提物，后经阳离子交换层析和反向高效液相色谱(RP-HPLC)对粗提物进行分离、纯化，用大肠杆菌（ATCC8099）、金黄色葡萄球菌（ATCC6538）作为抗菌活性试验的指示菌株，获得了一个抑菌活性较强的抗菌肽。经MALDI-TOF-MS质谱鉴定和序列比对分析得出，获得该抗菌肽的氨基酸序列，将其命名为SSH19。利用多肽合成仪合成猪脾脏抗菌肽SSH19，进行抗菌活性检测。结果表明，合成的抗菌肽SSH19对大肠杆菌（ATCC8099）、金黄色葡萄球菌（ATCC6538）有很好的抑菌效果。通过生物信息学相关软件对抗菌肽 SSH19进行理化特性、二级结构、跨膜区、信号肽、胞内定位、糖基化、泛素化、酶切位点和疏水性等相关数据进行分析，得出抗菌肽SSH19带7个正电荷，存在两个磷酸化位点、6个酶切位点、具亲水性，存在76%螺旋区域。
生猪养殖;家畜免疫;抗菌肽活性;质谱分析
河南科技学院
硕士
预防兽医学
胡建和
2017
中文
S858.28;S852.4
78
2018-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）