三七总皂苷对阿尔茨海默病氧化应激PI3K/Akt和PLCγ1/PKC信号通路的影响研究
目的：探讨三七总皂苷（PNS）对阿尔茨海默病氧化应激PI3K/Akt和PLCγ1/PKC信号通路影响的研究。 方法：3月龄雄性快速老化痴呆模型小鼠SAMP8随机分为模型组、PNS低剂量组（100mg/kg）、PNS高剂量组（200mg/kg）和石杉碱甲组（Huperzine A,0.3mg/kg），健康正常老化SAMR1小鼠为空白对照组，15只/组。适应性喂养一周后，PNS给药组和石杉碱甲组均以双蒸水调配后按照以上剂量灌胃给药，空白对照组和模型组给予等体积的生理盐水，每天1次，连续给药8周。应用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力的变化；HE染色观察各组小鼠脑组织海马区的病理学变化；PKC试剂盒检测SAMP8脑组织PKC的活力；Real-time qPCR技术测定小鼠脑组织PI3K，Akt，PLCγ1和PKC mRNA的水平；免疫组化和Western blot检测小鼠脑组织PI3K，p-Akt，Akt，p-PLCγ1和PLCγ1蛋白的表达。 结果： 1.Morris水迷宫实验：（1）定位航行实验结果显示：与SAMR1对照组比较，模型组的平均逃避潜伏期明显延长（P＜0.01），平台象限停留时间百分比显著降低（P＜0.01）；与模型组相比，PNS低、高剂量组小鼠的逃避潜伏期显著降低（P＜0.01），平台象限停留时间百分比明显增大，差异有统计学意义（P＜0.01）。（2）空间探索实验结果显示：与SAMR1对照组比较，模型组的原平台象限停留时间百分比减少（P＜0.05）；与模型组比较，PNS低、高剂量组小鼠的原平台象限停留时间百分比明显增加（P＜0.05），表明PNS对SAMP8的学习记忆能力有改善作用。 2.HE染色结果显示：与对照组比较，模型组小鼠海马区神经元数量明显减少；与模型组比较，PNS低、高剂量组的小鼠海马区神经元结构异常有所改善，细胞分布均匀，排列整齐，神经元数目和锥体细胞数量有所增加，小胶质细胞增生减少。 3.PKC试剂盒结果显示：与模型组比较，PNS低、高剂量组小鼠脑组织的PKC活性均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01）。 4.RT-qPCR结果显示：与模型组比较，PNS低剂量组小鼠脑组织的PI3K mRNA表达显著升高（P＜0.05），Akt，PLCγ1和PKC的mRNA含量有所升高，但差异无统计学意义（P＞0.05），PNS高剂量组小鼠脑组织的PI3K，Akt，PLCγ1和PKC mRNA表达水平均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）； 5.免疫组化结果显示：与SAMR1对照组比较，模型组SAMP8大脑海马区PI3K，p-Akt，Akt，p-PLCγ1和PLCγ1的免疫阳性细胞百分比均明显减少（P＜0.05或P＜0.01）；与模型组比较，PNS低、高剂量组的免疫阳性细胞百分比显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。 6.Western blot结果显示：与对照组比较，模型组SAMP8脑组织的Akt和PLCγ1的蛋白表达水平有所降低，但差异无统计学意义（P＞0.05），而PI3K，p-Akt和p-PLCγ1的蛋白表达水平显著降低（P＜0.05或P＜0.01）；与模型组比较，PNS低、高剂量组可不同程度提高SAMP8脑组织PI3K，p-Akt，Akt，p-PLCγ1和PLCγ1的蛋白表达水平，其中PI3K，p-Akt和p-PLCγ1的蛋白表达量差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。 结论： 1. PNS可以改善SAMP8小鼠的学习记忆功能。 2. PNS通过激活PI3K/Akt和PLCγ1/PKC信号通路，从而抑制氧化应激对SAMP8大脑的损伤。
阿尔茨海默病;快速老化痴呆;氧化应激;三七总皂苷干预;PLCγ1蛋白表达;学习记忆功能
广西中医药大学
硕士
药理学
钟振国;黄金兰
2016
中文
R749.16;R285.5
84
2017-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）