胰高糖素样肽-1受体激动剂对糖尿病大鼠胰岛α细胞形态和功能的影响
目的： 胰高糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂 Exendin-4（EX-4）对2型糖尿病大鼠胰岛α细胞形态和功能的影响目前尚不十分清楚。本研究通过不同浓度的 GLP-1受体激动剂EX-4对2型糖尿病大鼠模型进行干预，观察EX-4对2型糖尿病大鼠胰岛α细胞形态与功能的影响，从而为探讨2型糖尿病的病理生理学和临床应用提供新的理论依据。 方法： 采用高糖高脂喂养并联合1％的STZ（35mg/kg）腹腔注射建立T2DM大鼠模型。40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照（NC组，N=10）组和糖尿病组（n=30）。剔除造模失败死亡的大鼠后将剩余25只纳入本实验。分为糖尿病对照组（DC组,n=8）， Exendin-4治疗组(EX组,n=17)，其中EX低剂量组（EXL组n=8）, EX高剂量组（EXH组，n=9）。将Exendin-4溶于PBS溶液，EXL组左下腹腔注射5μg/kg，EXH组20μg/kg，每日定时两次（上午9：00和下午5：00），NC、DC组注射PBS，治疗8周。干预8周后，空腹12h,次日上午于给药0h,1h,2h,3h,后分别颈静脉抽血测血糖，取血清标本用放射免疫法测定血清胰高糖素。剥离胰腺组织，置于中性福尔马林液固定，然后石蜡包埋做切片备用。石蜡切片做 HE染色以观察形态学变化，免疫组化法染色观察胰高糖素表达水平，观察α细胞形态及数量变化。 结果： 1.各组大鼠及血清胰高糖素水平 干预前，DC组、EXL组及EXH组胰高糖素均较NC组明显升高（P<0.01）。干预8周后，EXL组及EXH胰高糖素水平较干预前下降（P<0.05），EXH组下降较EXL组显著（P<0.05），且低于与同期DC组（P<0.01）。 2.干预后于末次给药（0h,1h,2h,3h）监测血糖，绘制血糖曲线图 DM组、EXH组、EXL组大鼠血糖明显高于DC组，EXH组、EXL组血糖较DM组明显下降（P<0.01），EXH组下降幅度较EXL组大，且血糖随时间点增加而下降。 3.各组大鼠胰岛α细胞免疫组化染色结果 免疫组化法定位胰高糖素，Glucagon蛋白表达在细胞胞浆中，NC组Glucagon蛋白主要分布于胰岛外周的α细胞，且量较少，DC组和EX组Glucagon蛋白除分布在胰岛外周α细胞外，在胰岛中央也多见表达。干预8周后，与NC组相比，DC组和EX组胰高糖素蛋白表达明显增多，其中 EX组表达量少于 DC组。EXH组表达量少于 EXL组。 4.各组大鼠胰腺组织HE染色结果 NC组胰岛丰富形态饱满，细胞核居中分布在均匀的胞浆中。内分泌部胰岛和外分泌部腺小叶清晰可见。在DC组及实验组中，胰岛排列相对紧密，胰岛间多见管腔内存有红细胞的毛细血管分布。胰岛出现不同程度结构破坏以及脂肪的浸润和慢性炎症的改变。在DC组，上述改变最为显著。与DC组相比，EXL组EXH组上述改变有明显改善，且EXH组改善情况优于EXL组。 结论： GLP-1受体激动剂Exendin-4能够改善2型糖尿病大鼠胰岛α细胞形态，抑制过度增殖的大鼠胰岛α细胞的数量，抑制其分泌胰高糖素，从而有效降低血糖水平。
糖尿病;胰高糖素样肽-1;受体激动剂;α细胞形态;病理生理学
济南大学
硕士
临床医学（内科学）
荣海钦
2015
中文
R587.1
65
2017-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）