核苷磷酸化酶的工程菌构建
使用PCR扩增技术对来源于AEM0812菌株的核苷磷酸化酶基因进行扩增.利用克隆载体pD18-T进行连接,构建重组质粒pMD18-T-deoD,再将其导入Escherichia coli DH5α菌体内,克隆目的基因.利用表达载体pET-28a与目的基因构建重组质粒pET-28a-deoD,导入E.coli BL21(DE3)菌体内,获得工程菌E.coli(deoD).利用IPTG进行诱导表达,采用SDS-PAGE方法检测到在大约27 KD处出现了明显的蛋白条带,其分子量与已知的嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)的分子量(25.82 KD)一致,这表明在E.coli(deoD)中成功表达出deoD基因,同时表明成功构建了嘌吟核苷磷酸化酶(PNPase)工程菌.
嘌吟核苷磷酸化酶(PNPase)表达、工程菌、基因克隆与表达
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Q786(基因工程（遗传工程）)
河南省高等学校重点科研项目;郑州铁路职业技术学院校级课题
2023-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
60-62,67
