10.16433/j.1673-2383.2023.04.008
小麦麦谷蛋白高分子量亚基N端序列克隆及原核表达分析
为了探究麦谷蛋白高分子量亚基(HMW-GS)的 N-末端结构域对面粉品质的影响,以 HMW-GS的 1Dx5 的N-末端结构域(1Dx5-N)为目的基因进行序列克隆及原核表达,研究大肠杆菌 BL21(DE3)为载体菌进行转化,鉴定阳性克隆,以 IPTG 和乳糖作为诱导剂,并通过正交试验,筛选最佳的诱导条件.结果表明:1Dx5-N序列基因全长 267 bp,共编码氨基酸 89 个,预测分子质量为 16.211 kDa;经转化、阳性克隆鉴定后,证明了该表达载体能够在大肠杆菌中稳定遗传;IPTG和乳糖均可诱导 1Dx5-N 进行表达;SDS-PAGE 表明 1Dx5-N 重组蛋白多为包涵体蛋白;IPTG 诱导蛋白最佳表达条件为温度30℃,浓度 0.6 mmol/L,诱导时间 16 h;乳糖诱导蛋白最佳表达条件为温度 30℃、质量浓度 9 g/L、诱导时间 16 h.通过对比发现,乳糖可代替IP TG诱导 1Dx5-N蛋白表达.
麦谷蛋白高分子量亚基、1Dx5-N、末端结构域、原核表达
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TS201.2(食品工业)
国家粮食和物资储备局粮油食品工程技术研究中心开放课题;河南工业大学高层次人才科研启动基金项目;河南工业大学校基金项目
2023-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
60-66
