10.12102/j.issn.1672-1349.2022.23.007
基于细胞焦亡NF-κB信号通路探讨黄连解毒汤干预动脉粥样硬化斑块的作用机制
目的 构建新西兰兔动脉粥样硬化模型,从细胞焦亡角度研究黄连解毒汤对动脉粥样硬化的影响.方法 将60只雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、黄连解毒汤低剂量组、黄连解毒汤中剂量组、黄连解毒汤高剂量组、VX-765组,每组10只.高脂饲料喂养联合肌肉注射脂多糖(LPS)及腹腔注射维生素D3的复合方法进行造模.除空白组外,其余5组均给予复合方法进行造模.从第8周开始黄连解毒汤低剂量组、黄连解毒汤中剂量组、黄连解毒汤高剂量组分别给予黄连解毒汤每天0.75 g/kg、1.50 g/kg和3.00 g/kg灌胃,VX-765组给予氯喹[VX-765溶于二甲基亚砜(DMSO)溶液中]腹腔注射,空白组与模型组每天给予等容生理盐水灌胃,连续干预16周后,用3％戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔注射麻醉,采用腹主动脉取血休克法处死新西兰兔,分离主动脉组织.采用苏木精-伊红(HE)染色法观察新西兰兔主动脉斑块情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测新西兰兔血清炎性因子水平,免疫组化(IHC)法、实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法、免疫蛋白印迹(Western Blot)法评估细胞焦亡水平.结果 HE染色结果显示,模型组斑块形成明显,黄连解毒汤各干预组及VX-765组主动脉粥样硬化斑块较模型组明显减少,且以黄连解毒汤高剂量组与VX-765组疗效最佳.ELISA检测炎性因子结果提示,与空白组比较,模型组C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-18水平升高(P<0.01);与模型组比较,黄连解毒汤中剂量组、黄连解毒汤高剂量组、VX-765组CRP、IL-1β、TNF-α、TGF-β、IL-18水平下降(P<0.01);与黄连解毒汤中剂量组,黄连解毒汤高剂量组与VX-765组CRP、IL-1β、TNF-α、TGF-β、IL-18水平下降(P<0.01),且VX-765组下调IL-1β、IL-18水平较黄连解毒汤高剂量组更为明显(P<0.01).IHC法结果显示,与空白组比较,模型组IL-1β、IL-18、Caspase-1、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达水平上调(P<0.01);与模型组比较,黄连解毒汤低剂量组NLRP3表达水平下调(P<0.05),黄连解毒汤中剂量组IL-1β、NLRP3表达水平下调(P<0.05或P<0.01),黄连解毒汤高剂量组Caspase-1、IL-1β、IL-18、NLRP3表达水平下调(P<0.05或P<0.01),VX-765组Caspase-1、IL-1β、IL-18、NLRP3表达水平下调(P<0.01).RT-qPCR结果显示,与空白组比较,模型组Caspase-1、NLRP3基因表达升高(P<0.01);与模型组比较,黄连解毒汤低、中、高剂量组、VX-765组Caspase-1基因表达降低(P<0.01);与模型组比较,黄连解毒汤高剂量组、VX-765组NLRP3基因表达降低(P<0.01).Western Blot结果显示,与空白组比较,模型组Caspase-1、NLRP3蛋白相对表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,黄连解毒汤高剂量组Caspase-1、NLRP3蛋白相对表达水平下降(P<0.05或P<0.01),VX-765组Caspase-1、NLRP3蛋白相对表达水平下降(P<0.01);与空白组比较,模型组p50、p65蛋白相对表达水平上调(P<0.01),IkBα蛋白相对表达水平下调(P<0.01);与模型组比较,黄连解毒汤中剂量组p65蛋白相对表达水平下调(P<0.01),黄连解毒汤高剂量组p50、p65蛋白相对表达水平下调(P<0.05或P<0.01),IκBα蛋白相对表达水平上调(P<0.05),VX-765组p50、p65蛋白相对表达水平下调(P<0.01),IκBα蛋白相对表达水平上调(P<0.05).结论 黄连解毒汤可能通过介导核转录因子-κB(NF-κB)信号通路调控细胞焦亡水平,从而发挥稳定动脉粥样硬化斑块的作用.
动脉粥样硬化、黄连解毒汤、核转录因子-κB号通路、细胞焦亡
20
R735.7;R394.2;R285.5
广东省中医药局科研基金项目
2023-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
4265-4273
