10.12102/j.issn.1672-1349.2022.23.006
鹿红方调控Nrf2因子保护缺血/再灌注损伤心肌细胞的机制研究
目的 探究鹿红方防治心肌缺血/再灌注损伤的机制.方法 选取无特定病原体(SPF)级Wistar雄性大鼠40只,随机分为对照组、模型组、鹿红方低剂量组、鹿红方中剂量组、鹿红方高剂量组,根据鹿红方不同的剂量,连续灌胃7 d后,结扎左前降支30 min后复灌24 h制备心肌缺血再灌注损伤模型.将H9c2心肌细胞分为对照组、模型组、鹿红方低剂量组、鹿红方中剂量组、鹿红方高剂量组.鹿红方低剂量组、鹿红方中剂量组、鹿红方高剂量组分别加入6％、12％、18％鹿红方含药血清预处理,经液体石蜡封闭12 h后复氧2 h制备心肌缺氧/复氧模型.造模成功后取材,观察心肌梗死面积,苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织形态,检测心肌组织中血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量,DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)染色观察心肌细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心脏组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap-1)及核因子相关因子-2(Nrf2)蛋白含量.流式细胞观察H9c2心肌细胞凋亡率,检测心肌细胞及培养基中SOD、MDA、LDH含量,Western Blot检测心肌细胞中Keap-1及Nrf2蛋白含量.结果 与对照组比较,模型组心肌梗死面积较大,心肌细胞凋亡率较高,心肌细胞出现水肿、坏死的程度较重,MDA浓度明显升高,GSH和SOD含量明显下降(P<0.05),鹿红方低、中、高剂量组可以明显改善上述情况,以中、高剂量组最优.与对照组比较,模型组H9c2心肌细胞凋亡率较高,心肌细胞培养基上清液中LDH含量明显升高,心肌细胞中MDA浓度升高,SOD含量明显降低(P<0.05),而鹿红方低、中、高剂量可以有效改善上述指标,以中、高剂量组效果最优.在大鼠心肌缺血再灌注模型及H9c2心肌细胞缺氧/复氧模型中,与对照组比较,模型组Nrf2蛋白表达下降,鹿红方可以上调Nrf2蛋白表达,以中、高浓度效果最明显.此外,与对照组比较,模型组亚铁离子含量明显升高(P<0.05),鹿红方可以减低亚铁离子含量(P<0.05).结论 鹿红方可以减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与激活Keap-1/Nrf2/ARE抗氧化信号通路有关,从而减轻氧化应激,此外,减轻亚铁离子的蓄积可能是其潜在机制.
心肌缺血再灌注损伤、鹿红方、氧化应激、Keap-1/Nrf2/ARE信号通路、铁蓄积
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R-33;R541.4;R322.11
国家自然科学基金No.8210151929
2023-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
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