基于免核酸提取可视化RT-LAMP快速检测黄瓜绿斑驳花叶病毒
本文基于逆转录环介导恒温扩增(RT-LAMP)技术建立葫芦科作物中黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)免核酸提取的可视化快速检测方法.根据CGMMV全基因组序列,筛选保守区域并设计特异性RT-LAMP检测引物.通过荧光扩增方法(加SYTO-9)和可视化方法(加钙黄绿素),开展RT-LMAP特异性、灵敏度和重现性试验分析.结果表明,优化筛选的引物组可以特异性地检测CGMMV,检测灵敏度达到4.21×103 fg/μL,组内和组间变异系数均小于5％,重现性好.对瓜类作物田间种苗、植株叶片及市售种子等103份样品进行检测及一致性分析,表明该方法与基于RNA提取RT-LAMP、荧光RT-qPCR及免疫测试条检测结果之间的Kappa值均为1.0(1～1,95％置信区间),具有很好的一致性.基于免核酸提取的可视化RT-LAMP快检方法成为适合现场快速检测的理想选择,对于CGMMV危害葫芦科作物的田间监测以及疫情防控具有广泛的推广应用前景.
黄瓜绿斑驳花叶病毒、逆转录环介导恒温扩增(RT-LAMP)、可视化、免核酸提取
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S436.421(病虫害及其防治)
大连市高层次人才创新支持计划项目2019CT09
2023-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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