双重RT-PCR法同步检测单头异沙叶蝉携带的两种小麦病毒
异沙叶蝉可传播小麦矮缩病毒Wheat dwarf virus (WDV)和小麦黄条纹病毒Wheat yellow striate virus(WYSV)两种病毒.本文根据WDV和WYSV的基因序列分别设计两种病毒的特异性引物对,以含有上述两种病毒的异沙叶蝉样品总RNA为模板,以随机引物为3'端通用引物反转录获得cDNA,然后在同一个PCR反应体系加入两对引物,分别得到与预期相符的773 bp和322 bp扩增产物条带.通过对引物浓度、dNTP和rTaq用量以及退火温度等条件进行优化,建立了能在同一异沙叶蝉体内检测WDV与WYSV两种小麦病毒的双重RT-PCR方法.该双重PCR方法特异性强、敏感性高,可以快速准确地在一个体系里同步检测介体昆虫体内的两种病毒,有效地检测虫体内病毒带毒率,这些结果可为病毒预测预报和病害防治提供参考.
异沙叶蝉、小麦矮缩病毒、小麦黄条纹病毒、双重RT-PCR
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S435.12(病虫害及其防治)
国家重点研发计划;国家自然科学基金
2020-06-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
175-179,187