10.3969/j.issn.0529-1542.2012.02.022
葡萄根瘤蚜TaqMan-MGB实时荧光定量检测方法的研究
为建立葡萄根瘤蚜实时荧光定量PCR的检测方法,参考Karen Herbert等设计的特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,构建以标准阳性质粒作为标准品制作标准曲线,并经优化反应条件,建立葡萄根瘤蚜的实时荧光PCR绝对定量检测方法,进行敏感性和重复性试验,并对受葡萄根瘤蚜为害的葡萄根际土壤进行初步定性检测.结果表明:该方法的灵敏度可达1.625拷贝/μL,3次重复检测的变异系数均小于5％.提取0.25g含有10头葡萄根瘤蚜若虫土壤的DNA,并将其梯度稀释,用建立的荧光定量PCR进行检测,将DNA稀释103倍后,仍能检测出阳性结果.对受害葡萄根际土壤检测结果为阳性.葡萄根瘤蚜TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测技术具有特异性强,敏感性高,易操作等优点,有很好的应用前景和研究价值.
葡萄根瘤蚜、TaqMan-MGB、实时荧光定量PCR
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S436.631.21(病虫害及其防治)
国家葡萄产业技术体系CARS-30;农业部农作物病虫鼠害疫情监测与防治年度项目
2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
108-113
