10.3969/j.issn.0529-1542.2010.03.030
小麦白粉病菌基因组DNA的微量提取及ISSR-PCR反应体系的优化
为了寻找适合小麦白粉菌基因组DNA微量提取的方法,本试验利用改进的CTAB法、电钻微量研磨一管法、FastPrep DNA试剂盒法和Chelex-100法分别提取小麦白粉菌基因组DNA.比较得出,在微量提取时,CTAB法的提取率较高;在分生孢子量较多时,FastPrep DNA试剂盒方法提取的DNA质量较高,这两种方法提取的DNA均适用于ISSR-PCR.采用正交设计L16(45)法优化了适合于小麦白粉病菌群体的ISSR体系,确定了25 μL时优化的反应体系:1×buffer、模板DNA 0.5 ng、dNTP 0.14 mmol/L、TaqDNA聚合酶1U、引物1.4 μmol/L、Me2+1.8 mmoL/L.利用该体系筛选出了一批多态性较好的ISSR引物,为小麦白粉病菌遗传多样性研究奠定了基础.
小麦白粉病菌、DNA微量提取、ISSR-PCR、体系优化
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S435.121.146(病虫害及其防治)
国家重点基础研究发展计划课题2006CB100203;"十一五"科技支撑计划课题2006BAD08A05;公益性行业科研专项3-15;国家自然科学基金30671263
2010-07-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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