10.3969/j.issn.2095-1264.2013.06.022
TAT-tCNTF对CD诱导HUVEC细胞损伤的作用研究
目的探讨TAT-tCNTF对细胞松弛素D(CD)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤作用的影响。方法 CCK-8法检测TAT-tCNTF对CD致HUVEC生长抑制的作用;荧光显微镜检测CD诱导HUVEC的F-actin的变化,以及在TAT-tCNTF作用下对细胞微丝的影响;荧光显微镜和流式细胞术检测CD和TAT-tCNTF作用后细胞内Ca2+浓度;Western blot检测CD和TAT-tCNTF作用后F-actin的蛋白水平的变化。结果在1μg·ml-1的CD作用HUVEC后,细胞表现出明显的生长抑制,而在0.05~10μg·ml-1浓度范围内,TAT-tCNTF促进HUVEC的生长,并可改善CD对HUVEC的损伤,TAT-tCNTF组与CD+TAT-tCNTF组细胞活动度具有明显差异;荧光显微镜下检测到经CD作用后细胞F-actin分布减少,而经TAT-tCNTF作用后细胞F-actin分布密集;采用Fluo 4-AM荧光探针标记细胞内Ca2+浓度,荧光显微镜和流式细胞术检测到TAT-tCNTF能够降低经CD损伤HUVEC后的细胞内Ca2+浓度升高;FCM检测显示,CD组的MFI相对于对照组明显增加,而CD+TAT-tCNTF组MFI较CD组明显降低。Western blot显示各组之间的F-actin表达量没有明显改变。结论TAT-tCNTF对CD致内皮细胞的损伤有改善和逆转作用,其改善机制可能与增加细胞活性和维持细胞骨架有关。
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R966(药理学)
国家自然科学基金项目资助No 81001438。
2014-01-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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