10.11735/j.issn.1671-170X.2023.03.B009
微小RNA-9-5p干扰RhoA表达调控胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移
[目的]探讨微小 RNA(miR)-9-5p 在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)中表达及影响其生物学行为的机制.[方法]实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测定40例PDAC与正常人胰腺细胞系HPDE6-C7中miR-9-5p的表达.miR-9-5p模拟物转染PDAC细胞株PANC-1;甲基噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性;划痕实验、Transwell侵袭实验测定细胞侵袭、迁移能力.qPCR及蛋白印迹实验检测RhoA、ROCK1、PCNA、CyclinD1、MMP-2、MMP-9及p21表达.双荧光素酶报告基因分析实验检测miR-9-5p对RhoA的调控功能.[结果]①临床样本中miR-9-5p在PDAC 组织中的表达显著性低于癌旁组织(0.34±0.08 vs 1.01±0.24,t=13.222,P＜0.001).miR-9-5p 表达降低与胰腺癌淋巴结转移、肿瘤分期存在相关性.②miR-9-5p在胰腺癌细胞系PANC-1中表达明显低于正常人胰腺细胞系HPDE6-C7(0.28±0.04 vs 0.53±0.05,t=7.204,P=0.019).③双荧光素酶报告基因分析结果表明,野生型RhoA的荧光素酶活性在转染miR-9-5p模拟物后较对照组降低(0.99±0.08 vs 0.22±0.02,P＜0.001).④转染后,转染组细胞增殖活性降低(0.53±0.07 vs 1.09±0.11、1.13±0.08,P均＜0.001),侵袭距离减少(0.28±0.07 μm vs 0.66±0.05μm、0.64±0.07μm,P均＜0.001),迁移细胞数减少(32.83±2.99 vs 70.00±4.29、65.67±5.79,P均＜0.001).⑤与阴性对照组及 Scramble 组比较,miR-9-5p 模拟物转染组 RhoA、ROCK1、PCNA、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9 表达显著性降低,p21 表达升高(P均＜0.05).[结论]胰腺导管腺癌细胞中miR-9-5p表达降低;过表达miR-9-5p后能明显抑制PANC-1细胞的体外增殖、侵袭及迁移,其调控机制可能与RhoA信号通路相关.
胰腺导管腺癌、微小RNA-9-5p、RhoA信号通路
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R735.9(肿瘤学)
河北省卫生厅科研基金项目1020140005
2023-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
220-225
