10.3877/cma.j.issn.1674-3903.2021.05.002
心脏死亡器官捐献大鼠模型肝脏和血清微小核糖核酸表达谱分析
目的 探究心脏死亡器官捐献(DCD)大鼠模型肝脏和血清微小RNA(miRNA)表达特征.方法 采用随机数字表法将30只SD大鼠分为DCD组和对照组,每组15只.采用4％水合氯醛腹腔注射进行麻醉后,经腹正中切口剪断膈肌,诱导大鼠低血压和缺氧,进而诱发心脏停跳,构建DCD大鼠模型.对照组未剪断膈肌,麻醉与手术方法同DCD组.模型构建成功后经下腔静脉采血并获取肝脏组织.采用miRNA芯片检测肝脏和血清miRNA表达.采用随机数字表法从DCD组与对照组肝脏差异表达的miRNA中选取部分miRNA,通过实时定量PCR(qRT-PCR)进行验证.选取经qRT-PCR验证的肝脏组织中差异表达的miRNA以及DCD组与对照组肝脏和血清差异表达最显著的部分miRNA,通过miRDB数据库分析预测其靶基因,并进行功能分析.组间正态分布计量资料比较采用成组t检验或单因素方差分析.P＜0.05为差异有统计学意义.结果 DCD组血清ALT、AST和乳酸脱氢酶分别为(76±12)、(286 ±56)和(2539±122) U/L,对照组分别为(44±11)、(124 ±48)和(1658±126) U/L,差异均有统计学意义(t=4.622、16.916和16.315,P均＜0.05).DCD组大鼠肝脏组织中38个miRNA表达均高于对照组(Fold Change均＞2,P均＜0.05);90个miRNA表达下调(Fold Change均＜0.5,P均＜0.05).DCD组大鼠血清10个miRNA表达均高于对照组(Fold Change均＞2,P均＜0.05);11个miRNA表达下调(Fold Change均＜0.5,P均＜0.05).miR-100-5p、miR-540-3p和miR-10b-5p在肝脏与血清中同步表达上调(Fold Change均＞2,P均＜0.05);miR-1843a-5p和miR-342-5p同步表达下调(Fold Change均＜0.5,P均＜0.05).qRT-PCR检测结果示:DCD组肝脏组织miR-183-3p、miR-10b-5p、miR-487b-5p、miR-100-5p、miR-503-5p、miR-540-3p和miR-219a-2-3p相对表达均高于对照组,差异均有统计学意义(t=2.808、6.860、10.106、20.594、3.697、10.433和5.828,P均＜0.05);miR-3559-3p、miR-150-5p、miR-223-3p、miR-340-3p、miR-342-5p、miR-664-2-5p、miR-219b和miR-224-3p相对表达均低于对照组,差异均有统计学意义(t=-2.726、-3.318、-5.257、-4.845、-4.300、-5.082、-4.546和-3.481,P均＜0.05).miRNA靶基因预测分析显示,上述miRNA的靶基因包含一系列与DCD诱导肝损伤相关的重要生物学过程相关基因.结论 DCD大鼠肝脏和血清miRNA呈现特异性表达谱,这些失调的miRNA可能成为无创评估DCD供肝损伤的潜在生物标志物.
心脏死亡器官捐献、肝损伤、微小核糖核酸、表达谱、大鼠
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深圳市福田区卫生公益性科研项目;广东省器官捐献与移植免疫重点实验室科研项目
2022-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
262-269
