10.3877/cma.j.issn.1674-3903.2018.01.007
不同大鼠心脏死亡器官捐献模型肝脏损伤比较研究
目的 探讨不同大鼠心脏死亡器官捐献模型供肝损伤机制.方法 将15只SD大鼠按随机数字表法分为氯化钾注射组、膈肌剪断组、心尖夹闭组,每组5只.氯化钾注射组通过背部浅表层静脉注射10％氯化钾溶液诱导心脏停跳;膈肌剪断组将膈肌剪断导致大鼠低血压和缺氧,诱导心脏停跳;心尖夹闭组开腹后用血管夹夹住左、右心室顶端,诱导心脏停跳.记录各组大鼠心脏停跳时间.3组大鼠心脏停跳后立即下腔静脉采血,检测血清ALT、AST、葡萄糖、乳酸脱氢酶(LDH)含量.取各组大鼠肝脏组织行HE染色,光镜下观察肝脏组织病理学变化.检测各组大鼠肝脏组织中过氧化氢、一氧化氮含量.实时荧光定量PCR法检测大鼠肝脏组织B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Capase-3)转录情况.蛋白质印迹法检测大鼠肝脏组织磷酸化Akt(p-Akt)、Bax和Bcl-2蛋白表达情况.各组大鼠建模后心脏停跳时间、血清肝功能指标、肝脏组织一氧化氮和过氧化氢含量、凋亡相关分子(Bax、Bcl-2、Capase-3)转录水平及相关蛋白表达量比较均采用单因素方差分析.P＜0.05为差异有统计学意义.结果 膈肌剪断组和心尖夹闭组建模后心脏停跳时间分别为(720±137)、(1 020±142)s,均长于氯化钾注射组[(111 ±10)s,P均＜0.05];氯化钾注射组和膈肌剪断组血清ALT分别为(29±14)、(49 ±11)U/L,均低于心尖夹闭组[(71±13)U/L,P均＜0.05];心尖夹闭组血清AST、葡萄糖和LDH分别为(293±61)、(26.7±6.6)和(2 534 ±907) U/L,均高于氯化钾注射组[(131 ±67)、(15.8±8.5)、(1 528±1 170)U/L,P均＜0.05].HE染色结果显示心尖夹闭组和膈肌剪断组较氯化钾注射组有严重的充血和红细胞渗入,而心尖夹闭组与膈肌剪断组差异不明显.氯化钾注射组和膈肌剪断组肝脏组织过氧化氢含量分别为(13.8±3.7)、(13.7±1.8) mmol/L,均低于心尖夹闭组[(19.1±4.1)mmol/L,P均＜0.05];心尖夹闭组一氧化氮含量为(13.3 ±3.2) mmol/L,高于膈肌剪断组[(6.9±0.4) mmol/L,P＜0.05].氯化钾注射组Bax转录量低于膈肌剪断组,心尖夹闭组Bax表达量高于氯化钾注射组,氯化钾注射组P-Akt 473和P-Akt 308表达量显著高于心尖夹闭组(P均＜0.05).结论 氯化钾注射组对肝脏损伤影响最小,可能与细胞凋亡减少、P-akt相关信号通路激活有关.
心脏死亡器官捐献、凋亡、肝功能、机制、大鼠
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国家自然科学基金创新研究群体81721091;国家自然科学基金面上项目81470891;中国博士后科学基金面上项目2017M610374
2018-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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