10.3760/cma.j.cn112148-20190517-00267
Src激酶参与肿瘤坏死因子α诱导的心房肌细胞超快速延迟整流钾电流下调
目的:探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）是否通过调控超快速延迟整流钾电流（
Ikur）参与心房肌细胞的电重塑，以及Src激酶是否参与其中。
方法:将大鼠胚胎心肌细胞株H9c2细胞置于DMEM培养基中，将小鼠心房肌细胞株HL-1细胞置于Claycomb培养基中，于37 ℃ 5% CO
2培养箱中培养。以正常培养的细胞为对照组。予以不同浓度TNF-α干预细胞24 h，分别为TNF-α 25 ng/ml组、TNF-α 50 ng/ml组和TNF-α 100 ng/ml组。为观察Src抑制剂PP1能否逆转TNF-α作用，设置PP1+TNF-α组：先予10 μmol/L的PP1预处理1 h后再加入100 ng/ml TNF-α干预细胞24 h。采用Western blot检测各组细胞中形成
Ikur的主要钾通道蛋白Kv1.5、Src的表达水平。采用全细胞膜片钳检测各组细胞的
Ikur密度。
结果:（1）H9c2细胞中，TNF-α 100 ng/ml组细胞的Kv1.5蛋白表达水平低于对照组及TNF-α 25 ng/ml组（
P均<0.05）。各组细胞间Src蛋白表达水平差异无统计学意义（
P>0.05），但TNF-α 25 ng/ml组、TNF-α 50 ng/ml组及TNF-α 100 ng/ml组细胞磷酸化Src（p-Src）蛋白表达水平均高于对照组（
P均<0.05）。TNF-α 50 ng/ml组及TNF-α 100 ng/ml组细胞
Ikur电流密度均小于对照组（
P均<0.05）。PP1+TNF-α组细胞Kv1.5蛋白表达水平高于TNF-α 100 ng/ml组（
P<0.05），
Ikur电流密度大于TNF-α 100 ng/ml组（
P<0.01）。PP1+TNF-α组细胞Kv1.5蛋白表达水平及
Ikur电流密度与对照组比较差异均无统计学意义（
P均>0.05）。（2）在心房肌细胞株HL-1细胞中，TNF-α 100 ng/ml组细胞Kv1.5蛋白表达水平低于对照组和TNF-α 25 ng/ml组（
P均<0.01）。TNF-α 100 ng/ml组细胞p-Src蛋白表达水平高于对照组（
P<0.05）。各组细胞Src蛋白表达水平差异无统计学意义（
P>0.05）。PP1+TNF-α组细胞Kv1.5蛋白表达水平高于TNF-α 100 ng/ml组（
P<0.05）。
结论:在心房肌细胞中，TNF-α可能通过激活Src激酶降低Kv1.5蛋白表达水平，进而下调
Ikur，参与心房颤动的发生及发展过程。
心房颤动、肿瘤坏死因子α、Src激酶、超快速延迟整流钾电流、心房肌细胞
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国家自然科学基金81670314, 81870254;广州市科技计划项目201804010059;National Natural Science Foundation of China81670314, 81870254;Science and Technology Program of Guangzhou201804010059
2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
323-328
